Kit ELISA OX40/TNFRSF4 humano

OX40 (CD134; TNFRSF4) é uma molécula coestimuladora de células T da superfamília de receptores de TNF que se coordena com outros coestimuladores ligados à membrana, como CD28, CD40, CD30, CD27 e 4-1BB. OX40 é expresso em células T CD4+ virgens somente após envolvimento do TCR por células apresentadoras de antígeno (APC; células dendríticas e B) e coestimulação pelo ligante CD40/CD40 e CD28/B7. É máximo 2 a 5 dias após a ativação ou 4 horas após a reativação das células T de memória. OX40 humano é uma glicoproteína transmembrana tipo I de 48 kDa com uma sequência sinal de 28 aminoácidos (aa), um domínio extracelular (ECD) de 185 aa que possui quatro repetições TNFR - Cys e uma região de dobradiça O - glicosilada, um segmento transmembranar de 20 aa e um domínio citoplasmático de 41 aa. O ECD do OX40 humano mostra 71%, 68%, 67%, 64% e 64% de identidade aa com o ECD do OX40 de felino, canino, coelho, camundongo e rato, respectivamente. O envolvimento de OX40 em células T CD4+ ativadas pelo ligante OX40 em células dendríticas ativadas promove a sobrevivência e proliferação de células T, prolonga a resposta imune e aumenta o número de células que fazem a transição de células T efetoras para células T de memória. A transdução de sinal OX40 inclui a ligação de fatores associados ao receptor de TNF (TRAFs) e a ativação de NF kappa B e PI3 quinase para aumentar a expressão de citocinas, membros antiapoptóticos da família Bcl - 2, survivina e o receptor de quimiocina CXCR5. O CXCR5 promove a migração de células T para centros germinativos para fornecer ajuda de células B. Estudos utilizando camundongos knockout ou transgênicos e anticorpos agonísticos ou bloqueadores mostram que a interação OX40/OX40L é crítica para estabelecer ou reativar células T de memória e quebrar a tolerância imunológica. O bloqueio do envolvimento do OX40 é eficaz em modelos animais de inflamação alérgica das vias aéreas, doença do enxerto versus hospedeiro e doença autoimune.

pg/ml	OD		Média	Corrigido
0.00	0.0168	0.0150	0.0159
12.29	0.0413	0.0360	0.0387	0.0228
30.72	0.0754	0.0717	0.0736	0.0577
76.80	0.1554	0.1469	0.1512	0.1353
192.00	0.3511	0.3457	0.3484	0.3325
480.00	0.8416	0.8055	0.8236	0.8077
1200.00	1.8010	1.8460	1.8235	1.8076
3000.00	3.1860	3.2240	3.2050	3.1891

	Precisão intra-ensaio			Precisão Inter-ensaio
Número da amostra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Média (pg/ml)	68.3	374.5	1141.6	69.2	348.2	1106.9
Desvio Padrão	2.1	23.5	44.4	3.9	12.7	52.2
Coeficiente de Variação (%)	3.0	6.3	3.9	5.6	3.7	4.7

Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de OX40/TNFRSF4 humano em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 93% a 120%, com uma recuperação média global de 103%.

Matriz de Amostra	Amostra avaliada	Faixa (pg/ml)	Detectável (%)	Média de detectável (pg/ml)
Soro	30	19,5-94,28	100	59.08

Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis ​​foram avaliadas quanto à presença de OX40/TNFRSF4 neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.