Kit ELISA MMP-9 Humano

As metaloproteinases de matriz (MMPs), também chamadas de matricinas, constituem uma família de endopeptidases dependentes de zinco e cálcio que atuam na quebra da matriz extracelular (MEC) e no processamento de uma variedade de moléculas em diferentes ambientes subcelulares. Eles desempenham um papel importante em muitos processos fisiológicos normais, como desenvolvimento embrionário, morfogênese, reprodução e remodelação tecidual. Eles também participam de doenças inflamatórias e autoimunes, como artrite, câncer e doenças cardiovasculares. Embora as quantidades de MMPs recém-sintetizadas sejam reguladas principalmente nos níveis de transcrição, as atividades proteolíticas das MMPs existentes são controladas através da ativação de pró-enzimas ou zimogênios e da inibição de enzimas ativas por inibidores endógenos, alfa 2-Macroglobulina e inibidores teciduais de metaloproteinases (TIMPs). - MMP-9 (também referida como gelatinase B, colagenase tipo IV de 92 kDa, gelatinase de 92 kDa e colagenase tipo V) é secretada como uma pró-enzima glicosilada. A ativação da pró-enzima envolve a remoção proteolítica da região pro N-terminal, resultando na enzima ativa de 82 kDa. A MMP-9 humana ativa compartilha 72% e 74% de identidade de sequência de aminoácidos com a MMP-9 de camundongo e rato, respectivamente. Além do sítio de ligação ao zinco, o domínio catalítico também contém três unidades contíguas de homologia de fibronectina tipo II responsáveis ​​pela ligação à gelatina. Uma região de dobradiça rica em prolina liga o domínio catalítico ao domínio semelhante à hemopexina C-terminal. O tratamento in vitro da pró-enzima com acetato de 4-aminofenilmercúrico (APMA) produz não apenas a enzima ativa, mas também uma forma truncada C-terminal com atividade comparável à da forma ativa. MMP-9 degrada componentes da MEC com alta atividade específica para colágenos desnaturados (gelatina). Pode clivar colágenos nativos do tipo III, IV, V e XI, bem como Elastina, Nidogen-1 e Vitronectina. MMP - Esta ação pode aumentar ou diminuir a atividade biológica dos fatores solúveis e também pode liberá-los da associação com a MEC. MMP-9 também pode desencadear sinalização através de várias proteínas transmembrana ou inibir a sinalização induzindo sua liberação da superfície celular (por exemplo, CD44, E-Caderina, Integrinas, ICAM-1 e IL-2 R alfa).
A MMP-9 é produzida por uma variedade de células normais e transformadas, incluindo neutrófilos, monócitos, macrófagos, astrócitos, fibroblastos, osteoclastos, condrócitos, queratinócitos, células endoteliais e epiteliais. Exerce efeitos angiogênicos e remodeladores fisiológicos e patológicos na vasculatura. Os neutrófilos ativados liberam proMMP-9 que é livre de TIMP-1, permitindo a liberação de FGF-2 pró-angiogênico da MEC. MMP-9 em complexo com TIMP-1 não induz liberação de FGF-2. A MMP9 derivada de neutrófilos exacerba a resposta inflamatória, em parte gerando peptídeos derivados de colágeno que induzem a liberação de MMP9 neutrófilos adicionais. A MMP-9 também desempenha um papel na formação e remodelação óssea, na sensibilização e recompensa comportamental induzida pela metanfetamina, na regulação da remodelação das sinapses neuronais, na invasão trofoblástica durante a implantação e na inativação do Serpin alfa 1-Inibidor de proteinase. A eliminação de proteínas de adesão pela MMP-9 tem um efeito direto na invasividade das células tumorais.
Os níveis circulantes de MMP-9 estão aumentados em muitos distúrbios inflamatórios, incluindo formação de trombos intraluminais, aterosclerose, doença de Crohn, infecção pelo vírus da hepatite C, câncer colorretal e distrofia muscular de Duchenne. A proporção de MMP-9 para TIMP-1 também está aumentada no soro da esclerose múltipla e no escarro da fibrose cística, mas está diminuída no soro durante a infecção por citomegalovírus. Os níveis de MMP-9 livre e complexos de MMP-9 com Lipocalin-2/NGAL estão elevados na urina de pacientes com câncer de ovário e infecção do trato uterino, respectivamente.

pg/ml	OD		Média	Corrigido
0.00	0.0143	0.0140	0.0142
13.72	0.0212	0.0210	0.0211	0.007
41.15	0.0331	0.0334	0.0333	0.0191
123.46	0.0712	0.0673	0.0693	0.0551
370.37	0.1812	0.1728	0.1770	0.1629
1111.11	0.4692	0.4776	0.4734	0.4593
3333.33	1.2325	1.1987	1.2156	1.2015
10000.00	2.7141	2.6355	2.6748	2.6607

	Precisão intra-ensaio			Precisão Inter-ensaio
Número da amostra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Média (pg/ml)	225.2	1135.8	3363.1	234	1080.9	3328.7
Desvio Padrão	6.4	58.6	182.6	12.3	16.5	111.9
Coeficiente de Variação (%)	2.8	5.2	5.4	5.3	1.5	3.4

Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de MMP-9 humana em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 89% a 114%, com uma recuperação média global de 101%.

Matriz de Amostra	Amostra avaliada	Faixa (pg/ml)	Detectável (%)	Média de detectável (pg/ml)
Soro	30	203,3-765,1	100	428.1

Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de HGF neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.