Par de anticorpos humanos IL-8 ARExSet® para ELISA

A interleucina - 8 (IL - 8), também conhecida como IL - 8, GCP - 1 e NAP - 1, é um membro de 8 - 9 kDa de ligação à heparina da família alfa ou CXC de quimiocinas. Existem pelo menos 15 membros da família humana CXC que adotam uma estrutura de três folhas beta/uma alfa -hélice. A maioria das quimiocinas CXC mostra um motivo tripeptídeo N-terminal Glu-Leu-Arg (ELR). IL-8 circula como monômero, homodímero e heterodímero com CXCL4/PF4. O monômero é considerado o mais bioativo, enquanto o heterodímero pode potencializar a atividade do PF4. A oligomerização de IL-8 é modulada por suas interações com glicosaminoglicanos (GAGs) da matriz e da superfície celular. A IL-8 humana madura compartilha 65-69% de identidade de aminoácidos (aa) com a IL-8 canina, felina e suína. Não há contraparte do gene IL-8 em roedores.

Múltiplas isoformas de IL-8 são geradas através de splicing alternativo e clivagem proteolítica diferencial. Em humanos, o splicing alternativo gera uma isoforma com uma substituição de onze aa no terminal C. O processamento proteolítico resulta em truncamento N-terminal de IL-8 e é provavelmente um evento específico da célula. Por exemplo, fibroblastos e células endoteliais geram a forma 1-77 pela clivagem de IL-8 após Glu21, enquanto monócitos e linfócitos geram a forma 6-77 por clivagem após Leu25. Estas formas truncadas geralmente apresentam bioatividade aumentada, particularmente através do receptor CXCR1. A IL-8 também pode sofrer citrulinação na Arg27 do precursor, uma modificação que aumenta sua meia-vida e capacidade de induzir leucocitose. Uma grande variedade de células secretam IL-8, incluindo monócitos e neutrófilos, fibroblastos e queratinócitos, mastócitos, células musculares lisas viscerais, células dendríticas, grandes células alveolares tipo II e células endoteliais.

A bioatividade da IL-8 é mediada por dois receptores acoplados à proteína G, denominados CXCR1/IL-8 RA e CXCR2/IL-8 RB. CXCR1 tem tamanho de 45-50 kDa e é usado quase exclusivamente por IL-8. O CXCR2 tem tamanho de 35-40 kDa e é usado por quase todas as quimiocinas CXC. Tanto o CXCR1 quanto o CXCR2 associam-se constitutivamente em homodímeros funcionais. Eles também podem heterodimerizar, mas estes complexos se dissociam após a ligação de IL-8. O CXCR2 responde a baixas concentrações de IL-8 e está principalmente associado à quimiotaxia e à liberação de MMP-9. O CXCR1, por outro lado, responde a altas concentrações de IL-8 e está associado à explosão respiratória e à ativação da fosfolipase D2. Assim, a ligação do CXCR2 induz a adesão de leucócitos ao endotélio vascular ativado e a migração para locais de inflamação, enquanto a ligação do CXCR1 estimula a atividade antimicrobiana dos neutrófilos. A IL-8 também pode formar um complexo com a Serpina A1/alfa-1 Antitripsina, e isso evita a interação da IL-8 com o CXCR1.

Além dos seus efeitos pró-inflamatórios, a IL-8 está envolvida na angiogênese e na patogênese da aterosclerose e do câncer. Induz a expressão de VEGF em células endoteliais vasculares e funciona como um fator autócrino para o crescimento de CE e angiogênese. É regulado positivamente em lesões ateroscleróticas e elevado no soro e no líquido cefalorraquidiano após infarto do miocárdio. No câncer, a IL-8 promove a transição epitelial-mesenquimal, bem como a invasividade e metástase das células tumorais.

• Pareamentos otimizados de anticorpos de captura e detecção com concentrações recomendadas economizam um longo tempo de desenvolvimento
• Protocolos de desenvolvimento são fornecidos para orientar a otimização adicional do ensaio

• Alternativa econômica para kits completos

• Capturar Anticorpo
• Anticorpo de detecção
• Padrão Recombinante
• Estreptavidina conjugada com rábano-peroxidase (Estreptavidina-HRP)

1. ARExSet^® Kit de reagentes auxiliares (5 placas): contendo microplacas de 96 poços, selantes de placas, solução de substrato, solução de parada, tampão de revestimento de placas (PBS), tampão de lavagem e tampão de ensaio.
   
   1. Microplacas de 96 poços:AREX Biosciences, Catálogo # DSEP01. Selantes de Placa: AREX Biosciences, Catálogo # DSSF01.
   2. Tampão de revestimento:NaCl 137 mM, KCl 2,7 mM, Na2HPO4 8,1 mM, KH2PO4 1,5 mM, pH 7,2-7,4, 0,2 μm fi
      filtrado. AREX Biosciences, Catálogo # DSCB01.
   3. Buffer de bloqueio: AREX Biociências, Catálogo # DSBB01.
   4. Tampão de lavagem:0,05% de Tween 20 em PBS, pH 7,2-7,4. AREX Biosciences, Catálogo # DSWB01.
   5. Tampão de ensaio:0,5% BSA, 0,05% Tween20, solução PBS. AREX Biociências, Catálogo # DSAB01
      Solução de substrato:Tetrametilbenzidina. AREX Biosciences, Catálogo # DSTS01.
   6. Solução de parada:0,5 mol/ml de H2SO4. AREX Biosciences, Catálogo # DSSS01.