Kit Humano Granzyme B ELISA
Livreto de Protocolo
Principais recursos e detalhes
- Especificação:
- Sensibilidade:
- Faixa de curva padrão:
- Gradiente de curva padrão:
- Número de incubações:
- Volume de amostra:
- Tipo de ensaio:
- Duração da Operação:
-
Marca:
GATO.NÃO. : AEH0052
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Tamanho:
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Detalhes do produto
Plano de fundo
A granzima B é um membro da família das granzimas de serina proteases encontradas especificamente em grânulos de linfócitos T citotóxicos (CTL) e células natural killer (NK). A granzima B desempenha um papel essencial na apoptose mediada por grânulos utilizando os substratos nesta via, como Caspase 3, Caspase 8 e Bid. Pesquisas recentes indicam funcionalidade expandida da Granzima B para incluir funções extracelulares juntamente com sua função pró-apoptótica clássica. Verificou-se que a Granzima B é um importante mediador de lesões, reparação e inflamação da pele através de substratos extracelulares, incluindo Laminina, VE-Caderina, Fibronectina e os proteoglicanos Aggrecan e Decorin.
Como uma das cinco granzimas (A, B, H, K e M) identificadas no genoma humano, a granzima B (32kDa) é a mais amplamente pesquisada em termos de sua função biológica e sua utilidade na saúde e na doença. É sintetizado como um precursor (247 resíduos) com um peptídeo sinal (resíduos 1-18), um pró-peptídeo (resíduos 19-20) e uma cadeia madura (resíduos 21-247). Uma vez dentro dos grânulos, a granzima B é totalmente processada na cadeia madura e se torna uma protease ativa quando o pró-peptídeo, Gly - homólogos do rato, respectivamente.
Foi demonstrado que as granzimas modulam a inflamação, e os níveis plasmáticos de granzima B foram encontrados mais elevados na dermatite atópica e na psoríase quando comparados aos controles saudáveis. Isto contrasta com os níveis plasmáticos de granzima A, que permanecem inalterados. O soro de pacientes com doença de Crohn apresenta níveis de granzima B significativamente mais elevados do que os controles.
Como uma das cinco granzimas (A, B, H, K e M) identificadas no genoma humano, a granzima B (32kDa) é a mais amplamente pesquisada em termos de sua função biológica e sua utilidade na saúde e na doença. É sintetizado como um precursor (247 resíduos) com um peptídeo sinal (resíduos 1-18), um pró-peptídeo (resíduos 19-20) e uma cadeia madura (resíduos 21-247). Uma vez dentro dos grânulos, a granzima B é totalmente processada na cadeia madura e se torna uma protease ativa quando o pró-peptídeo, Gly - homólogos do rato, respectivamente.
Foi demonstrado que as granzimas modulam a inflamação, e os níveis plasmáticos de granzima B foram encontrados mais elevados na dermatite atópica e na psoríase quando comparados aos controles saudáveis. Isto contrasta com os níveis plasmáticos de granzima A, que permanecem inalterados. O soro de pacientes com doença de Crohn apresenta níveis de granzima B significativamente mais elevados do que os controles.
Dados típicos
| pg/ml | OD | Média | Corrigido | |
| 0.00 | 0.0147 | 0.0140 | 0.0144 | |
| 6.86 | 0.0275 | 0.0263 | 0.0269 | 0.0126 |
| 20.58 | 0.0453 | 0.0453 | 0.0453 | 0.0310 |
| 61.73 | 0.1044 | 0.1023 | 0.1034 | 0.0890 |
| 185.19 | 0.2562 | 0.2565 | 0.2564 | 0.2420 |
| 555.56 | 0.7001 | 0.7000 | 0.7001 | 0.6857 |
| 1666.67 | 1.6770 | 1.6800 | 1.6785 | 1.6642 |
| 5000.00 | 3.0660 | 3.0670 | 3.0665 | 3.0522 |
Precisão
| Precisão intra-ensaio | Precisão Inter-ensaio | |||||
| Número da amostra | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Média (pg/ml) | 97.1 | 448.0 | 1618.5 | 84.9 | 453.4 | 1514.2 |
| Desvio Padrão | 5.1 | 17.4 | 58.5 | 3.7 | 10.0 | 31.0 |
| Coeficiente de Variação (%) | 5.2 | 3.9 | 3.6 | 4.3 | 2.2 | 2.1 |
Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Recuperação de pico
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de Granzima B humana em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 102% a 112%, com uma recuperação média global de 110%.
A recuperação variou de 102% a 112%, com uma recuperação média global de 110%.
Valores de amostra
| Matriz de Amostra | Amostra avaliada | Faixa (pg/ml) | Detectável (%) | Média de detectável (pg/ml) |
| Soro | 30 | 9,62-835,77 | 100 | 230.34 |
Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas neste ensaio. Os históricos médicos dos doadores não estavam disponíveis.
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