Kit ELISA G-CSF humano

O fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF) é uma glicoproteína monomérica de 24-25 kDa que regula a proliferação, diferenciação e ativação de células hematopoiéticas na linhagem de granulócitos neutrofílicos. O G-CSF humano maduro é uma proteína O-glicosilada de 178 aminoácidos (aa) que contém duas pontes dissulfeto intracadeia. Em humanos, o splicing alternativo gera uma segunda isoforma menor com uma deleção de 3 aa. O G - CSF de camundongo e humano compartilham 76% de identidade de sequência aa, e as duas proteínas apresentam reatividade cruzada de espécies. G-CSF é produzido por monócitos e macrófagos ativados, fibroblastos, células endoteliais, astrócitos, neurônios e células do estroma da medula óssea. Além disso, várias células tumorais expressam G-CSF constitutivamente. O receptor G - CSF humano (G - CSF R) é uma glicoproteína transmembrana tipo I de 120 kDa que pertence à superfamília dos receptores da hematopoietina. A proteína madura consiste em um domínio extracelular (ECD) de 603 aa, um segmento transmembranar de 23 aa e um domínio citoplasmático de 186 aa. O ECD contém um domínio semelhante a Ig N-terminal, um domínio de homologia de receptor de citocina e três domínios de fibronectina tipo III. O splicing alternativo do G - CSF R humano gera isoformas adicionais, incluindo uma forma potencialmente solúvel do receptor. Os ECDs de G-CSF R de camundongo e humano compartilham 63% de identidade de sequência aa. G-CSF R forma um complexo com o ligante na proporção de 2:2. É expresso em monócitos, neutrófilos, megacariócitos, plaquetas, progenitores mieloides, trofoblastos e placenta, células endoteliais e vários tipos de células tumorais. G-CSF é um importante regulador da granulopoiese in vivo, e mutações em G-CSF R estão associadas à neutropenia congênita. O G-CSF pode apoiar o crescimento de células progenitoras hematopoiéticas multilinhagens e mobilizá-las da medula óssea para a corrente sanguínea. O G-CSF aumenta a capacidade funcional dos neutrófilos maduros e apoia a sua sobrevivência, limitando a taxa de apoptose. G-CSF também aumenta a monocitopoiese induzida por M-CSF a partir de células progenitoras hematopoiéticas e estimula a proliferação de células dendríticas indutoras de Th2- periféricas. Promove o desenvolvimento da tolerância imunológica das células T, bem como a recuperação dos tecidos após infarto do miocárdio e isquemia cerebral.

pg/ml	OD		Média	Corrigido
0.00	0.0148	0.0144	0.0146
8.19	0.0336	0.0353	0.0345	0.0199
20.48	0.0645	0.0670	0.0658	0.0512
51.20	0.1376	0.1524	0.1450	0.1304
128.00	0.3456	0.3250	0.3353	0.3207
320.00	0.8238	0.8329	0.8284	0.8138
800.00	1.7270	1.9720	1.8495	1.8349
2000.00	3.5990	3.7930	3.6960	3.6814

	Precisão intra-ensaio			Precisão Inter-ensaio
Número da amostra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Média (pg/ml)	49.6	227.9	737.9	43.6	210.6	661.4
Desvio Padrão	2.9	6.7	49.3	1.2	9.5	18.9
Coeficiente de Variação (%)	5.9	2.9	6.7	2.6	4.5	2.9

Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de G-CSF humano em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência. A recuperação variou de 80% a 119%, com uma recuperação média global de 101%.

Matriz de Amostra	Amostra avaliada	Faixa (pg/ml)	Detectável (%)	Média de detectável (pg/ml)
Soro	30	0,72-42,44	100	6.93

Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis ​​foram avaliadas quanto à presença de G-CSF neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.