Kit ELISA CD30 humano
Livreto de Protocolo
Principais recursos e detalhes
- Espécies:
- Tamanho:
- Volume de amostra:
- Faixa de curva padrão:
- Tipo de ensaio:
- Sensibilidade:
- Duração da Operação:
- Tipo de ensaio:
-
Marca:
GATO.NÃO. : AEH0105
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Detalhes do produto
Plano de fundo
CD30, também conhecido como antígeno Ki - 1 e TNFRSF8, é uma glicoproteína transmembrana tipo I de 120 kDa pertencente à superfamília de receptores de TNF. O CD30 humano maduro consiste em um domínio extracelular (ECD) de 361 aminoácidos (aa) com seis repetições ricas em cisteína, um segmento transmembranar de 28 aa e um domínio citoplasmático de 188 aa. Em contraste, o CD30 de camundongo e rato não possui 90 aa do ECD e contém apenas três repetições ricas em cisteína. Dentro das regiões comuns do ECD, o CD30 humano compartilha 53% e 49% de identidade de sequência aa com CD30 de camundongo e rato, respectivamente. O splicing alternativo do CD30 humano gera uma isoforma que inclui apenas o terminal C 132 aa do domínio citoplasmático. CD30 é normalmente expresso em células Th e células B estimuladas por antígeno. No entanto, é regulado positivamente na doença de Hodgkin (nas células Reed-Sternberg), outros linfomas, inflamação crónica e autoimunidade. CD30 liga-se ao ligante CD30/TNFSF8 que é expresso em células Th ativadas, monócitos, granulócitos e células epiteliais medulares do timo. A sinalização CD30 co-estimula a proliferação Th0 e Th2 induzida pelo antígeno e a secreção de citocinas, mas favorece uma resposta imune tendenciosa para Th2. Na ausência de estimulação antigênica, ainda pode induzir a expressão de IL-13 em células T. O CD30 contribui para a seleção negativa do timo ao induzir a morte celular apoptótica de células T CD4+CD8+. Nas células B, a ligação do CD30 promove a proliferação celular e a produção de anticorpos, além da expressão de CXCR4, CCL3 e CCL5. Uma forma solúvel de CD30 de 85-90 kDa é eliminada da superfície celular por clivagem mediada por TACE-. O CD30 solúvel mantém a capacidade de se ligar ao ligante CD30 e funciona como um inibidor da sinalização normal do CD30.
Dados típicos
|
pg/ml |
OD |
Média |
Corrigido |
|
|
0.00 |
0.0345 |
0.0329 |
0.0337 |
|
|
312.50 |
0.0936 |
0.0922 |
0.0929 |
0.0592 |
|
625.00 |
0.1418 |
0.1472 |
0.1445 |
0.1108 |
|
1250.00 |
0.2482 |
0.2518 |
0.2500 |
0.2163 |
|
2500.00 |
0.4908 |
0.4994 |
0.4951 |
0.4614 |
|
5000.00 |
0.9079 |
0.9281 |
0.9180 |
0.8843 |
|
10000.00 |
1.8010 |
1.8280 |
1.8145 |
1.7808 |
|
20000.00 |
3.2730 |
3.2200 |
3.2465 |
3.2128 |
Precisão
|
Precisão intra-ensaio |
Precisão Inter-ensaio |
|||||
|
Número da amostra |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Média（pg/ml） |
87.5 |
398.2 |
1088.4 |
84.1 |
408.2 |
1263.3 |
|
Desvio padrão |
5.2 |
21.2 |
81.8 |
2.9 |
25.6 |
82.2 |
|
Coeficiente de variação（%） |
6.0 |
5.3 |
6.0 |
3.5 |
6.3 |
6.5 |
Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Recuperação de pico
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de CD30 humano em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência. A recuperação variou de 83% a 98%, com uma recuperação média geral de 93%.
Valores de amostra
|
Matriz de Amostra |
Amostra avaliada |
Faixa (pg/ml) |
Detectável % |
Média de detectável (pg/ml) |
|
Soro |
30 |
643,28-1550,80 |
100 |
965.76 |
Soro/Plasma - Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de CD30 humano neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.
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