Kit beta humano-NGF ELISA
Livreto de Protocolo
Principais recursos e detalhes
- Especificação:
- Sensibilidade:
- Faixa de curva padrão:
- Gradiente de curva padrão:
- Número de incubações:
- Volume de amostra:
- Tipo de ensaio:
- Duração da Operação:
-
Marca:
GATO.NÃO. : AEH0065
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Tamanho:
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Detalhes do produto
Plano de fundo
O NGF foi inicialmente isolado na glândula submandibular de camundongo como um complexo 7S composto de três subunidades ligadas não covalentemente, alfa, beta e gama. Ambas as subunidades alfa e gama do NGF são membros da família da calicreína das serina proteases, enquanto a subunidade beta, chamada beta -NGF ou 2,5S NGF, exibe todas as atividades biológicas atribuídas ao NGF. O beta -NGF humano recombinante é um homodímero de dois polipeptídeos de 120 aminoácidos. A proteína humana compartilha aproximadamente 90% de homologia no nível de aminoácidos com o beta -NGF de camundongo e rato e exibe atividade entre espécies.
O NGF é uma proteína neurotrópica bem caracterizada que desempenha um papel crítico no desenvolvimento de neurônios simpáticos e de alguns neurônios sensoriais no sistema nervoso periférico. Além disso, o NGF também pode atuar no sistema nervoso central como fator trófico para neurônios colinérgicos do prosencéfalo basal. Também foi demonstrado que o NGF tem efeitos biológicos em tecidos não neuronais. O NGF é mitogênico para uma linha celular eritroleucêmica humana dependente de fator, TF-1. Descobriu-se que o NGF aumenta o número de mastócitos em ratos neonatos e induz a liberação de histamina dos mastócitos peritoneais. O NGF aumentará a liberação de histamina e modulará fortemente a formação de mediadores lipídicos pelos basófilos em resposta a vários estímulos. O NGF também induzirá o crescimento e a diferenciação de linfócitos B humanos, bem como suprimirá a apoptose de neutrófilos peritoneais murinos. Estes resultados, tomados em conjunto, sugerem que o NGF é uma citocina pleiotrópica que, para além das suas actividades neurotrópicas, pode ter um papel importante na regulação do sistema imunitário.
O NGF é uma proteína neurotrópica bem caracterizada que desempenha um papel crítico no desenvolvimento de neurônios simpáticos e de alguns neurônios sensoriais no sistema nervoso periférico. Além disso, o NGF também pode atuar no sistema nervoso central como fator trófico para neurônios colinérgicos do prosencéfalo basal. Também foi demonstrado que o NGF tem efeitos biológicos em tecidos não neuronais. O NGF é mitogênico para uma linha celular eritroleucêmica humana dependente de fator, TF-1. Descobriu-se que o NGF aumenta o número de mastócitos em ratos neonatos e induz a liberação de histamina dos mastócitos peritoneais. O NGF aumentará a liberação de histamina e modulará fortemente a formação de mediadores lipídicos pelos basófilos em resposta a vários estímulos. O NGF também induzirá o crescimento e a diferenciação de linfócitos B humanos, bem como suprimirá a apoptose de neutrófilos peritoneais murinos. Estes resultados, tomados em conjunto, sugerem que o NGF é uma citocina pleiotrópica que, para além das suas actividades neurotrópicas, pode ter um papel importante na regulação do sistema imunitário.
Dados típicos
|
pg/ml |
OD |
Média |
Corrigido |
|
|
0.00 |
0.0172 |
0.0164 |
0.0168 |
|
|
6.86 |
0.0228 |
0.0234 |
0.0231 |
0.0063 |
|
20.58 |
0.0418 |
0.0405 |
0.0412 |
0.0244 |
|
61.73 |
0.1004 |
0.1016 |
0.1010 |
0.0842 |
|
185.19 |
0.2676 |
0.2957 |
0.2817 |
0.2649 |
|
555.56 |
0.7539 |
0.8159 |
0.7849 |
0.7681 |
|
1666.67 |
1.9450 |
1.9640 |
1.9545 |
1.9377 |
|
5000.00 |
3.3400 |
3.7610 |
3.5505 |
3.5337 |
Precisão
| Precisão intra-ensaio | Precisão Inter-ensaio | |||||
| Número da amostra | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Média (pg/ml) | 188 | 1692.3 | 2668.5 | 204 | 977.6 | 2851.8 |
| Desvio Padrão | 11.4 | 74.7 | 142.2 | 11.8 | 43.6 | 106.6 |
| Coeficiente de Variação (%) | 6 | 4.4 | 5.3 | 5.8 | 4.5 | 3.7 |
Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Recuperação de pico
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de beta-NGF humano em amostras de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 104% a 132%, com uma recuperação média global de 117%.
A recuperação variou de 104% a 132%, com uma recuperação média global de 117%.
Valores de amostra
| Matriz de Amostra | Amostra avaliada | Faixa (pg/ml) | Detectável (%) | Média de detectável (pg/ml) |
| Soro | 30 | n.d.-17.92 | 87.5 | 7.23 |
Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de beta-NGF neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.
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