Sua etiqueta Anticorpo Monoclonal de Coelho (ARA796)

Todas as pistas: anticorpo Anti-His tag na diluição de 1:2.000
PM observado: Depende da proteína de fusão com His tag

Pista 1: proteína de fusão com etiqueta N-terminal 6X His
Pista 2: proteína de fusão com etiqueta C-terminal 6X His
Pista 3: Proteína de fusão Multi-tag contendo 6X His tag
Pista 4: lisado de células 293-transfectadas com gene marcado com N-terminal 6X His
Pista 5: lisado de células 293-transfectadas com gene marcado C-terminal 6X His
Pista 6: proteína de fusão com etiqueta N-terminal 6X His
Pista 7: proteína de fusão com etiqueta C-terminal 6X His
Pista 8: lisado de células 293 não transfectadas

Lisado a 20 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000
Exposição: anos 60

Histograma de sobreposição mostrando 293 células transfectadas com N-terminal (azul) e C-terminal (vermelho) 6X gene marcado com His corado com ARA796. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA796, diluição 1:1.000) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

Coloração ARA796 de células 293 transfectadas com gene marcado com N-terminal 6X His por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:10.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Coloração ARA796 de células 293 transfectadas com gene C-terminal 6X His marcado por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:800) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Sua etiqueta foi imunoprecipitada a partir de 0,05 mg de lisado de 293 células inteiras transfectadas com gene N-terminal 6X His marcado com ARA796 na diluição de 1:50.
2º Ab: GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA796 IP em lisado de células inteiras 293 transfectadas com gene marcado com N-terminal 6X His
Pista 2: PBS em vez de ARA796 em lisado de células inteiras 293 transfectadas com gene marcado com N-terminal 6X His
Pista 3: 293 lisado de células inteiras transfectadas com gene marcado com N-terminal 6X His, 10 μg (entrada)
Exposição: 20s

Sua etiqueta foi imunoprecipitada a partir de 0,2 mg de lisado de 293 células inteiras transfectadas com gene C-terminal 6X His marcado com ARA796 na diluição de 1:50.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500
Pista 1: ARA796 IP em lisado de 293 células inteiras transfectadas com gene marcado C-terminal 6X His
Pista 2: PBS em vez de ARA796 em 293 células inteiras lisadas transfectadas com gene marcado C-terminal 6X His
Pista 3: lisado de 293 células inteiras transfectadas com gene marcado C-terminal 6X His, 10 μg (entrada)
Exposição: 120s