Anticorpo policlonal de coelho HIF PHD3

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para HIF PHD3

Alvo: HIF PHD3
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA15525

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Prolil hidroxilase que medeia a hidroxilação de resíduos de prolina em proteínas alvo, como PKM, TELO2, ATF4, GPX4 e HIF1A. As proteínas alvo são preferencialmente reconhecidas através de um motivo LXXLAP. Sensor de oxigênio celular que catalisa, em condições normóxicas, a formação pós-traducional de 4-hidroxiprolina em proteínas alfa do fator induzível por hipóxia (HIF). Hidroxila uma prolina específica encontrada em cada um dos domínios de degradação dependente de oxigênio (ODD) (N-terminal, NODD e C-terminal, CODD) de HIF1A. Também hidroxila o HIF2A. Tem preferência pelo site CODD tanto para HIF1A quanto para HIF2A. A hidroxilação no sítio NODD pelo EGLN3 parece exigir hidroxilação prévia no sítio CODD.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:2000
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para HIF PHD3
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína HIF PHD3
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Proteína de fusão recombinante de HIF PHD3 humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 27 kD; Observado: 32 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	Egl nove homólogo 3; HPH-1; Hipóxia - fator indutível prolil hidroxilase 3; HIF-PH3; HIF-prolil hidroxilase 3; HPH-3; Domínio prolil hidroxilase - contendo proteína 3; PHD3
Símbolo Genético	EGLN3
Gene Entrez	112399(Humano); 112407(Rato); 54702 (Rato)
SwissProt	Q9H6Z9(Humano); Q91UZ4(Rato); Q62630(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de HIF PHD3 em lisados de células inteiras de fígado de camundongo (A). (Tamanho de banda previsto: 27 kD; Tamanho de banda observado: 32 kD)

Análise imunofluorescente da coloração HIF PHD3 em células U2OS. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado com Alexa Fluor 488-(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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