Anticorpo monoclonal de coelho GAPDH (ARA795)

Principais recursos e detalhes

  • Alvo: GAPDH
  • Fonte/Hospedeiro: Coelho
  • Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino, Porco, Frango, Sapo com garras africanas,
  • Clonalidade: Monoclonal
  • Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
  • Conjugação: Não conjugado
  • Armazenamento: a-20°C
  • Marca:
GATO.NÃO. : ARA6582
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Tamanho:
Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco
Detalhes do produto
Plano de fundo
Folha de dados do produto de anticorpo monoclonal de coelho recombinante GAPDH Peso molecular previsto: 36kDa Pureza: IgG purificada por afinidade ProA Espécies cruzadas - atividades de gliceraldeído - 3 - fosfato desidrogenase e nitrosilase, desempenhando assim um papel na glicólise e nas funções nucleares, respectivamente
Aplicação
Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB

1:5000-1:40000

IHQ

1:1600-1:3200

SE/ICC

1:2000-1:10000

FC

1:200-1:1000

IP

1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.
Visão geral

Descrição

Anticorpo Monoclonal de Coelho para GAPDH

Tipo de anticorpo

Anticorpo primário

PM previsto

36kDa

Imunogênio

Um peptídeo sintético correspondente aos resíduos aa200-300 de GAPDH humano foi utilizado como imunogénio.

Purificação

IgG purificada por afinidade ProA

Formulário/Buffer

PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,70%.

Nomes alternativos

GPD; Gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase; GAPDH; Peptidil-cisteína S-nitrosilase GAPDH

Símbolo Genético

GAPDH

Gene Entrez

2597(Humano); 100042025(Rato); 24383 (Rato)

SwissProt

P04406

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-GAPDH na diluição 1:40.000
MW previsto: 36 kDa
PM observado: 36 kDa

Pista 1: A431
Pista 2: MCF-7
Pista 3: HCT-116
Pista 4: 293
Pista 5: Hela
Pista 6: Raji
Pista 7: Jurkat

Lisado a 2 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000
Exposição: anos 60

Todas as pistas: Anticorpo Anti-GAPDH na diluição 1:40.000
MW previsto: 36 kDa
PM observado: 36 kDa

Pista 1: MDBK
Pista 2: Cos-7
Pista 3: Coração de Galinha
Pista 4: Coração de Porco
Pista 5: Sapo com garras africanas
Pista 6: Peixe-zebra

Lisado a 2 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000
Exposição: anos 50

Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de câncer de próstata marcando GAPDH com ARA795 a 1:1.600. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

ARA795 coloração GAPDH em células Hela por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:10.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 594- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células Hela coradas com ARA795 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA795, diluição 1:1.000) em 1x PBS/1% BSA durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

GAPDH foi imunoprecipitado a partir de 0,1 mg de lisado de células inteiras Hela com ARA795 na diluição de 1:50.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA795 IP em lisado de células inteiras Hela
Pista 2: PBS em vez de ARA795 no lisado de células inteiras Hela
Pista 3: lisado de células inteiras Hela, 2 μg (entrada)

Armazenamento
Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.
Nota
Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.
Perguntas frequentes
Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?
Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.
Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?
Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.
O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?
Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.
Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?
A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.
Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?
É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.
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