Anticorpo monoclonal de coelho ERK1 (ARA780)

Principais recursos e detalhes

  • Alvo: ERK1
  • Fonte/Hospedeiro: Coelho
  • Reatividade: Humano, Rato, Rato
  • Clonalidade: Monoclonal
  • Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
  • Conjugação: Não conjugado
  • Armazenamento: a-20°C
  • Marca:
GATO.NÃO. : ARA6567
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Detalhes do produto
Plano de fundo
Folha de dados do produto do anticorpo monoclonal de coelho recombinante ERK1 Peso molecular previsto: 43kDa Pureza: IgG purificada por afinidade com ProA Reatividade cruzada de espécies: Rato humano Forma de rato: Líquido Reatividade cruzada de espécies determinada por WB Swissprot ID: P27361 Aplicações: WB IHC IF/ICC FC IP Fundo: ERK1 e ERK2 pertencem à superfamília da proteína quinase. Está envolvido tanto na iniciação quanto na regulação da meiose, mitose e funções pós-mitóticas em células diferenciadas, fosforilando um número
Aplicação
Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB

1:2000-1:10000

IHQ

1:100-1:200

SE/ICC

1:50-1:200

FC

1:200-1:1000

IP

1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.
Visão geral

Descrição

Anticorpo monoclonal de coelho para ERK1

Tipo de anticorpo

Anticorpo primário

PM previsto

43kDa

Imunogênio

Um peptídeo sintético correspondente ao termo N de ERK1 foi utilizado como imunógeno.

Purificação

IgG purificada por afinidade ProA

Formulário/Buffer

PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,55%.

Nomes alternativos

ERK1; PRKM3; proteína quinase 3 ativada por mitógeno; MAP quinase 3; MAPA 3; ERT2; Sinal extracelular - quinase 1 regulada; ERK-1; MAP2 quinase estimulada por insulina; isoforma p44 da MAP quinase; p44-MAPK; Microtúbulo - proteína 2 quinase associada; p44-ERK1

Símbolo Genético

MAPK3

Gene Entrez

5595 (Humano)

SwissProt

P27361

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Dados

Todas as pistas: anticorpo anti-ERK1 na diluição 1:2.000

MW previsto: 43 kDa

PM observado: 44 kDa



Pista 1: Hela

Pista 2: 293T

Pista 3: Raw264.7

Pista 4: A431

Pista 5: A375



Lisado a 10 µg por pista

2º Ab:

GAR HRP(H+L) 1:5.000

Exposição: anos 50

Todas as pistas: anticorpo anti-ERK1 na diluição 1:2.000

MW previsto: 43 kDa

PM observado: 44 kDa



Pista 1: Mu Brain

Pista 2: Rim Mu

Pista 3: Mu Fígado

Pista 4: Cérebro de Rato

Pista 5: Rim de Rato



Lisado a 10 µg por pista

2º Ab:

GAR HRP(H+L) 1:5.000

Exposição: 20s

Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) Marcação de tecido de câncer de colo do útero ERK1 com ARA780 a 1:200. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

ARA780 coloração ERK1 em células Hela por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:50) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contracoloração nuclear.



Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células Hela coradas com ARA780 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA780, diluição 1:1.000) em 1x PBS/1% BSA durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

ERK1 foi imunoprecipitado a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras A375 com ARA780 na diluição de 1:50.
2º Ab:

GAR HRP para IP 1:500



Pista 1: ARA780 IP em lisado de células inteiras A375

Pista 2: PBS em vez de ARA780 no lisado de células inteiras A375

Pista 3: lisado de células inteiras A375, 10 µg (entrada)



Exposição: 120s

Armazenamento
Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.
Nota
Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.
Perguntas frequentes
Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?
Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.
Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?
Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.
O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?
Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.
Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?
A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.
Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?
É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.
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