Anticorpo policlonal de coelho ERK1/2 (Phospho-Y204)

Ficha técnica

FISPQ

ERK1/2 (Phospho-Y204) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para ERK1/2 (Phospho-Y204)

Alvo: ERK1/2 (Fósforo-Y204)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino, Frango, Peixe-Zebra
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA11057

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Serina/treonina quinase que atua como um componente essencial da via de transdução de sinal da MAP quinase. MAPK1/ERK2 e MAPK3/ERK1 são as 2 MAPKs que desempenham um papel importante na cascata MAPK/ERK. Eles participam também de uma cascata de sinalização iniciada por KIT e KITLG/SCF ativados. Dependendo do contexto celular, a cascata MAPK/ERK medeia diversas funções biológicas, como crescimento, adesão, sobrevivência e diferenciação celular, através da regulação da transcrição, tradução e rearranjos do citoesqueleto. A cascata MAPK/ERK também desempenha um papel na iniciação e regulação da meiose, mitose e funções pós-mitóticas em células diferenciadas, fosforilando vários fatores de transcrição. Cerca de 160 substratos já foram descobertos para ERKs.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para ERK1/2 (Phospho-Y204)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína ERK1/2 apenas quando fosforilada em Y204.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH-correspondente aos resíduos que rodeiam Y204 da proteína ERK1/2 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 43; Observados: 44; 42kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	MAPK3; ERK1; PRKM3; proteína quinase 3 ativada por mitógeno; MAP quinase 3; MAPA 3; ERT2; Sinal extracelular - quinase 1 regulada; ERK-1; MAP2 quinase estimulada por insulina; isoforma p44 da MAP quinase; p44-MAPK; Microtúbulo - proteína 2 quinase associada; p44-ERK1; MAPK1; ERK2; PRKM1; PRKM2; proteína quinase 1 ativada por mitógeno; MAP quinase 1; MAPA 1; ERT1; Sinal extracelular - quinase 2 regulada; ERK-2; isoforma p42 da MAP quinase; p42-MAPK; proteína quinase 2 ativada por mitógeno; MAP cinase 2; MAPA 2
Símbolo Genético	MAPK1; MAPK3
Gene Entrez	5595; 5594 (Humano); 26417; 26413(Rato); 50689; 116590(Rato)
SwissProt	P27361; P28482(Humano); Q63844; P63085(Rato); P21708; P63086(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de ERK1/2 (Phospho-Y204) em lisados de células inteiras HCT116 (A), A549 (B). (Tamanho de banda previsto: 43; 41 kD; Tamanho de banda observado: 44; 42 kD)

Análise imunohistoquímica da coloração ERK1/2 (Phospho-Y204) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de cérebro humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração ERK1/2 (Phospho-Y204) em células MCF7. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado com Alexa Fluor 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Curva de dose-resposta direta de anticorpo ELISA usando Anticorpo Anti-ERK1/2 (Phospho-Y204). A concentração de antígeno (fosfopeptídeo e não fosfopeptídeo) é de 5 ug/ml. Anti-IgG de Cabra-Coelho (H&L) - O HRP foi utilizado como anticorpo secundário e o sinal foi desenvolvido pelo substrato TMB.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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