Anticorpo monoclonal de coelho EIF4E (Phospho-S209) (C1652)

Ficha técnica

FISPQ

EIF4E (Phospho-S209) Rabbit Monoclonal Antibody(C1652)

Principais recursos e detalhes

Anticorpo monoclonal de coelho recombinante para EIF4E (Phospho-S209)

Alvo: EIF4E (Fósforo-S209)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB, IHC, IF/ICC, IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : AMA01264

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Atua no citoplasma para iniciar e regular a síntese de proteínas e é necessário no núcleo para exportação de um subconjunto de mRNAs do núcleo para o citoplasma que promove processos como capeamento, processamento e splicing de RNA. Componente do complexo proteico eIF4F, que está envolvido no reconhecimento do cap do mRNA, no desenrolamento dependente de ATP da estrutura secundária 5'-terminal e no recrutamento de mRNA para o ribossomo. Esta proteína reconhece e se liga à capa de mRNA contendo 7 - metilguanosina (m7G) - durante uma etapa inicial no início da síntese protéica e facilita a ligação ao ribossomo, induzindo o desenrolamento das estruturas secundárias do mRNA.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200
IP	1:10 - 1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de coelho recombinante para EIF4E (Phospho-S209)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína EIF4E apenas quando fosforilada em S209.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário, recombinante
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam S209 da proteína EIF4E humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 25 kD; Observado: 25 kD
Formulário/Buffer	Líquido em PBS, pH 7,4, contendo 50% de glicerol, 0,2% de BSA e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	EIF4EL1; FEI4F; Fator de iniciação da tradução eucariótica 4E; eIF-4E; eIF4E; subunidade eIF-4F 25 kDa; cap de mRNA - proteína de ligação
Símbolo Genético	FEI4E
Gene Entrez	1977(Humano); 13684(Rato); 117045(Rato)
SwissProt	P06730(Humano); P63073(Rato); P63074(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de EIF4E (Phospho-S209) em lisados de células inteiras de Hela (A), pulmão de camundongo (B), cérebro de rato (C). (Tamanho de banda previsto: 25 kD; Tamanho de banda observado: 25 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração EIF4E (Phospho - S209) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de baço de camundongo. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração EIF4E (Phospho-S209) em células NIH3T3. Células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS por 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% por 30 minutos em temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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