Anticorpo monoclonal de coelho EGFR (ARA731)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Alvo: EGFR
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : ARA6518

US$ Por favor escolha

Tamanho:

100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Folha de dados do produto do anticorpo monoclonal de coelho recombinante EGFR Peso molecular previsto: 134kDa Pureza: Espécies de IgG purificadas por afinidade ProA Reatividade cruzada: Rato humano Forma de rato: Líquido Espécies cruzadas - cascatas de sinalização para converter sinais extracelulares em respostas celulares apropriadas. Ligantes conhecidos incluem EGF, TGFA/TGF- um

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:5000-1:10000
IHQ	1:100-1:200
SE/ICC	1:200-1:800
FC	1:50-1:200
IP	1:10

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de coelho para EGFR
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
PM previsto	134kDa
Imunogênio	Um peptídeo sintético correspondente a resíduos de EGFR dentro do aa1000 - 1100 (intracelular) do EGFR humano foi utilizado como imunógeno.
Purificação	IgG purificada por afinidade ProA
Formulário/Buffer	PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,06%.
Nomes alternativos	ERBB; ERBB1; HER1; Receptor do fator de crescimento epidérmico; Proto-oncogene c-ErbB-1; Receptor tirosina-proteína quinase erbB-1
Símbolo Genético	EGFR
Gene Entrez	1956(Humano); 13649 (Rato)
SwissProt	P00533

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-EGFR na diluição 1:5.000
MW previsto: 134 kDa
PM observado: 175 kDa

Pista 1: PC-3
Pista 2: SH-SY5Y
Pista 3: A549
Pista 4: Hela
Pista 5: A431
Pista 6: HaCat
Pista 7: Pele Mu
Pista 8: Pele de rato

Lisado a 10 μg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Exposição: 100s

Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de câncer de pulmão humano marcando EGFR com ARA731 a 1:200. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

ARA731 coloração de EGFR em células A431 por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:200) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.
Controle: PBS e anticorpo secundário, um Alexa Fluor® 488-conjugado Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células A431 coradas com ARA731 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA731, diluição 1:200) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

O EGFR foi imunoprecipitado a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras A431 com ARA731 na diluição de 1:10.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500
Pista 1: ARA731 IP em lisado de células inteiras A431
Pista 2: PBS em vez de ARA731 no lisado de células inteiras A431
Pista 3: lisado de células inteiras A431, 10 μg (entrada)
Exposição: 120s

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

Novos produtos

Anticorpo monoclonal de coelho CD68 (ARA633)

Anticorpo monoclonal de camundongo CD74 (ARA635)

Human CD74 Mouse Monoclonal Antibody Pair(ARA634/ARA635)

Par de anticorpos monoclonais de camundongo CD74 humano (ARA634/ARA635)

Anticorpo monoclonal de coelho CRBN (ARA644)

Jogo HEK293 HCP ELISA