DNA-PKcs (Phospho-T2647) Anticorpo Policlonal de Coelho

Ficha técnica

FISPQ

DNA-PKcs (Phospho-T2647) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para DNA-PKcs (Phospho-T2647)

Alvo: DNA-PKcs (Fósforo-T2647)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Macaco
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA10014

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Serina/treonina-proteína quinase que atua como um sensor molecular para danos no DNA. Envolvido na união de extremidades não homólogas (NHEJ) do DNA necessária para reparo de quebra de fita dupla (DSB) e recombinação V(D)J. Deve estar ligado ao DNA para expressar suas propriedades catalíticas. Promove o processamento de estruturas de DNA em gancho na recombinação V(D)J pela ativação da endonuclease artemis em gancho (DCLRE1C). Recrutado por XRCC5 e XRCC6 para as extremidades do DNA e é necessário para (1) proteger e alinhar as extremidades quebradas do DNA, evitando assim sua degradação, (2) e sequestrar o DSB para reparo pelo NHEJ. Atua como uma proteína de suporte para ajudar na localização das proteínas de reparo do DNA no local do dano. A montagem do complexo DNA-PK nas extremidades do DNA também é necessária para a etapa de ligação do NHEJ.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para DNA-PKcs (Phospho-T2647)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína DNA-PKcs somente quando fosforilada em T2647.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	KLH - fosfopeptídeo sintético conjugado correspondente aos resíduos que circundam T2647 da proteína DNA - PKcs humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 469 kD; Observado: 460 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes Alternativos	HYRC; HYRC1; subunidade catalítica da proteína quinase dependente de DNA; subunidade catalítica DNA-PK; DNA-PKcs; DNPK1; p460
Símbolo Genético	PRKDC
Gene Entrez	5591 (Humano)
SwissProt	P78527(Humano)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de DNA-PKcs (Phospho-T2647) em lisados de células inteiras Jurkat (A), HeLa (B). (Tamanho de banda previsto: 469 kD; Tamanho de banda observado: 460 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de DNA - PKcs (Phospho - T2647) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente de coloração DNA-PKcs (Phospho-T2647) em células Jurkat. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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