Anticorpo monoclonal de coelho citoqueratina 8 (ARA739)

Principais recursos e detalhes

  • Alvo: Citoqueratina 8
  • Fonte/Hospedeiro: Coelho
  • Reatividade: Humano
  • Clonalidade: Monoclonal
  • Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
  • Conjugação: Não conjugado
  • Armazenamento: a-20°C
  • Marca:
GATO.NÃO. : ARA6526
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Detalhes do produto
Plano de fundo
Anticorpo monoclonal de coelho recombinante citoqueratina 8 Folha de dados do produto Peso molecular previsto: 53kDa Pureza: IgG purificada por afinidade ProA Espécies cruzadas - músculo estriado.
Aplicação
Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB

1:2500-1:5000

IHQ

1:100-1:200

SE/ICC

1:5000-1:10000

FC

1:200-1:800

IP

13h30

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.
Visão geral

Descrição

Anticorpo monoclonal de coelho para citoqueratina 8

Tipo de anticorpo

Anticorpo primário

PM previsto

53kDa

Imunogênio

Um péptido sintético correspondente a resíduos no terminal C da citoqueratina 8 humana foi utilizado como imunogénio.

Purificação

IgG purificada por afinidade ProA

Formulário/Buffer

PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,14%.

Nomes alternativos

CYK8; Queratina, citoesqueleto tipo II 8; Citoqueratina-8; CK-8; Queratina-8; K8; Tipo-II queratina Kb8

Símbolo Genético

KRT8

Gene Entrez

3856 (Humano)

SwissProt

P05787

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-Citoqueratina 8 na diluição 1:5.000
MW previsto: 53 kDa
PM observado: 53 kDa
Pista 1: A431
Pista 2: HepG2

Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Exposição: 100s

Todas as pistas: Anticorpo Anti-Citoqueratina 8 na diluição 1:2.000
MW previsto: 53 kDa
PM observado: 53 kDa
Pista 1: Hela
Pista 2: SW480
Pista 3: A549

Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Exposição: 100s

Análise imuno-histoquímica (Formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de cólon humano marcando Citoqueratina 8 com ARA739 a 1:200. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

Coloração de ARA739 com citoqueratina 8 em células Hela por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:10.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.
Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células Hela coradas com ARA739 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA739, diluição 1:800) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

A citoqueratina 8 foi imunoprecipitada a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras A431 com ARA739 na diluição de 1:30.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA739 IP em lisado de células inteiras A431
Pista 2: PBS em vez de ARA739 no lisado de células inteiras A431
Pista 3: lisado de células inteiras A431, 10 μg (entrada)

Exposição: 20s

Armazenamento
Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.
Nota
Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.
Perguntas frequentes
Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?
Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.
Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?
Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.
O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?
Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.
Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?
A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.
Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?
É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.
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