Anticorpo monoclonal de coelho citoqueratina 18 (ARA800)

Ficha técnica

FISPQ

Cytokeratin 18 Rabbit Monoclonal Antibody(ARA800)

Principais recursos e detalhes

Alvo: Citoqueratina 18
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : ARA6587

US$ Por favor escolha

Tamanho:

100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Anticorpo monoclonal de coelho recombinante citoqueratina 18 Folha de dados do produto Peso molecular previsto: 48kDa Pureza: IgG purificada por afinidade ProA Espécies cruzadas - células. Quando fosforilado, desempenha um papel na reorganização do filamento. Envolvido na entrega de CFTR mutado à membrana plasmática.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:2000-1:5000
IHQ	1:800-1:1600
SE/ICC	1:800-1:2000
IP	1:25

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de coelho para citoqueratina 18
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
PM previsto	48kDa
Imunogênio	Um péptido sintético correspondente a resíduos no terminal C da Citoqueratina 18 humana foi utilizado como imunogénio.
Purificação	IgG purificada por afinidade ProA
Formulário/Buffer	PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,75%.
Nomes alternativos	CYK18; Queratina, citoesqueleto tipo I 18; Proteína do gene 46 indutora de proliferação celular; Citoqueratina-18; CK-18; Queratina-18; K18
Símbolo Genético	KRT18
Gene Entrez	3875(Humano); 16668(Rato); 294853 (Rato)
SwissProt	P05783

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-Citoqueratina 18 na diluição 1:10.000
MW previsto: 48 kDa
PM observado: 48 kDa

Pista 1: Hela
Pista 2: A431
Pista 3: HepG2
Pista 4: T47D
Pista 5: MCF-7
Pista 6: A549

Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000

Todas as pistas: Anticorpo Anti-Citoqueratina 18 na diluição de 1:5.000
MW previsto: 48 kDa
PM observado: 48 kDa

Pista 1: Fígado de Rato

Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000

Análise imuno-histoquímica (Formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de adenocarcinoma de cólon marcando Citoqueratina 18 com ARA800 a 1:1.600. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

Coloração ARA800 com Citoqueratina 18 em células HCT-116 por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:2.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células HCT-116 coradas com citoqueratina 18 com ARA800 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA800, diluição 1:2.000) em 1x PBS/1% BSA durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

A citoqueratina 18 foi imunoprecipitada a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras Hela com ARA800 na diluição de 1:25.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA800 IP em lisado de células inteiras Hela
Pista 2: PBS em vez de ARA800 no lisado de células inteiras Hela
Pista 3: lisado de células inteiras Hela, 10 μg (entrada)
Exposição: 20s

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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