Anticorpo monoclonal de coelho CDK4 (ARA778)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Alvo: CDK4
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB,IF/ICC,FC,IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : ARA6565

US$ Por favor escolha

Tamanho:

100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Folha de dados do produto do anticorpo monoclonal de coelho recombinante CDK4 Peso molecular previsto: 34kDa Pureza: Espécies de IgG purificadas por afinidade ProA Reatividade cruzada: Rato humano Forma: Líquido Espécies cruzadas - ciclo. É fundamental para o G1- para a transição de fase S- durante o ciclo celular e sua expressão é controlada principalmente no transcrito

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:1000-1:2000
SE/ICC	1:25-1:100
FC	1:10-1:100
IP	1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de coelho para CDK4
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
PM previsto	34kDa
Imunogênio	Um peptídeo sintético correspondente ao termo N de CDK4 foi utilizado como imunógeno.
Purificação	IgG purificada por afinidade ProA
Formulário/Buffer	PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,53%.
Nomes alternativos	quinase 4 dependente de ciclina; Proteína quinase de divisão celular 4; PSK-J3
Símbolo Genético	CDK4
Gene Entrez	1019(Humano); 12567(Rato); 94201 (Rato)
SwissProt	P11802

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-CDK4 na diluição de 1:1.000
MW previsto: 34 kDa
PM observado: 34 kDa

Pista 1: Hela
Pista 2: K562
Pista 3: 3T3
Pista 4: Rim Mu

Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000
Exposição: 20s

ARA778 colorindo CDK4 em células MCF-7 por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:25) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células Hela coradas com ARA778 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA778, diluição 1:100) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

CDK4 foi imunoprecipitado a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras Hela com ARA778 na diluição de 1:50.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA778 IP em lisado de células inteiras Hela
Pista 2: PBS em vez de ARA778 no lisado de células inteiras Hela
Pista 3: lisado de células inteiras Hela, 10 μg (entrada)

Exposição: anos 60

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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