Anticorpo monoclonal de coelho CD3 (ARA817)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Alvo: CD3
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB,IHC,IF/ICC,FC,IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : ARA6607

US$ Por favor escolha

Tamanho:

100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Folha de dados do produto do anticorpo monoclonal de coelho recombinante CD3 Peso molecular previsto: 23kDa Pureza: IgG purificada por afinidade com ProA Espécies cruzadas - 20-50 kDa, compreendendo domínios extracelular, transmembrana e intracelular. O complexo CD3 é responsável por

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:10.000-1:50.000
IHQ	1:100-1:200
SE/ICC	1:50-1:2000
FC	1:200-1:1000
IP	1:15

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo Monoclonal de Coelho para CD3
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
PM previsto	23kDa
Imunogênio	Um péptido sintético correspondente a resíduos no terminal N do CD3 humano foi utilizado como imunogénio.
Purificação	IgG purificada por afinidade ProA
Formulário/Buffer	PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,92%.
Nomes alternativos	T3E; cadeia épsilon CD3 da glicoproteína de superfície celular; cadeia épsilon T3/Leu-4 do antígeno de superfície celular; CD3e
Símbolo Genético	CD3E
Gene Entrez	916 (Humano)
SwissProt	P07766

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-CD3 na diluição 1:10.000
MW previsto: 23 kDa
PM observado: 23 kDa
Pista 1: JurKat
Lisado a 10 µg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:4.000
Exposição: anos 60

Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de tonsila humana marcando CD3 com ARA817 a 1:200. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.

Coloração de ARA817 CD3 em células Jurkat por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:50) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.
Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histograma de sobreposição mostrando células Jurkat coradas com ARA817 (azul). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% durante 10 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA817, diluição 1:1.000) em 1x PBS/1% BSA durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (Vermelho) foi usada como controle.

O CD3 foi imunoprecipitado a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras Molt-4 com ARA817 na diluição de 1:15.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500
Pista 1: ARA817 IP em Molt-4 lisado de células inteiras
Pista 2: IgG de coelho em vez de ARA817 no lisado de células inteiras Molt-4
Pista 3: Molt-4 lisado de células inteiras, 10 µg (entrada)
Exposição: 120s

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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