Caspase-3 (pro+p17) Anticorpo Monoclonal de Coelho (ARA793)

Ficha técnica

FISPQ

Caspase-3 (pro+p17) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA793)

Principais recursos e detalhes

Alvo: Caspase-3 (pró+p17)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB,IF/ICC,FC,IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : ARA6580

US$ Por favor escolha

Tamanho:

100μL

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Detalhes do produto

Plano de fundo

Rev.: 2024/1/18 Caspase-3 (pro+p17) Anticorpo monoclonal de coelho recombinante Catálogo# BX00082 Ficha técnica do produto Clone# RR686 Peso molecular previsto: 32/17kDa Pureza: ProA purificada por afinidade de IgG Espécies Cruzada-reatividade: Forma Humana: Líquido Espécies cruzadas-reatividade determinada por WB Swissprot ID: P42574 Aplicações: WB IF/ICC FC IP Antecedentes: Envolvido na cascata de ativação de caspases responsáveis pela execução da apoptose. No início da apoptose, ele cliva proteoliticamente o poli (ADP - ribose) polim

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:1000-1:2000
SE/ICC	1:200-1:800
FC	1:200-1:1000
IP	1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo Monoclonal de Coelho para Caspase-3 (pro+p17)
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
PM previsto	32/17kDa
Imunogênio	Um peptídeo sintético correspondente a aa1-100 da Caspase-3 humana foi utilizado como imunógeno.
Purificação	IgG purificada por afinidade ProA
Formulário/Buffer	PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,68%.
Nomes alternativos	CPP32; Caspase-3; CASP-3; Apopaína; Cisteína protease CPP32; CPP-32; Proteína Yama; Atividade de clivagem de SREBP 1; SCA-1
Símbolo Genético	CASP3
Gene Entrez	836 (Humano); 12367(Rato); 25402 (Rato)
SwissProt	P42574

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Todas as pistas: Anticorpo Anti-Caspase-3 na diluição 1:2.000
MW previsto: 32/17 kDa
PM observado: 35/17 kDa

Lane +: Jurkat tratado com 1 uM de estaurosporina por 4h
Lane -: Jurkat sem tratamento

Lisado a 20 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:5.000
Exposição: 20s
Este anticorpo é específico para a forma pro e a forma clivada por p17 de

A caspase - 3 foi imunoprecipitada a partir de 0,4 mg de lisado de células inteiras Jurkat com ARA793 na diluição de 1:50.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500

Pista 1: ARA793 IP em lisado de células inteiras Jurkat
Pista 2: PBS em vez de ARA793 em lisado de células inteiras Jurkat
Pista 3: lisado de células inteiras Jurkat, 10 μg (entrada)

Histograma de sobreposição mostrando células Ramos coradas com ARA793 (vermelho). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA793, diluição 1:1.000) em 1x PBS/1% BSA durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor^® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (preta) foi usada como controle.

Coloração ARA793 Caspase-3 em células Jurkat por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:800) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 594- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.

Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor^® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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