Anticorpo Policlonal de Coelho ATG5

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para ATG5

Alvo: ATG5
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA11315

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Envolvido na formação de vesículas autofágicas. A conjugação com ATG12, através de um sistema de conjugação semelhante à ubiquitina, envolvendo ATG7 como enzima ativadora semelhante a E1 e ATG10 como enzima conjugadora semelhante a E2, é essencial para sua função. O conjugado ATG12-ATG5 atua como uma enzima semelhante a E3-que é necessária para a lipidação das proteínas da família ATG8 e sua associação às membranas das vesículas. Envolvido no controle de qualidade mitocondrial após dano oxidativo e na subsequente longevidade celular. Desempenha um papel crítico em múltiplos aspectos do desenvolvimento de linfócitos e é essencial para a sobrevivência e proliferação de linfócitos B e T. Necessário para processamento e apresentação ideais de antígenos para MHC II.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para ATG5
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína ATG5.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região C - term do ATG5 humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 32 kD; Observado: 55 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes Alternativos	APG5L; ASP; Proteína de autofagia 5; APG5 - semelhante; Apoptose - proteína específica
Símbolo Genético	ATG5
Gene Entrez	9474 (Humano)
SwissProt	Q9H1Y0(Humano)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de ATG5 em lisados de células inteiras HepG2 (A), Myla2059 (B), HCT116 (C), U87MG (D). (Tamanho de banda previsto: 32 kD; Tamanho de banda observado: 55 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração ATG5 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de pulmão humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração ATG5 em células A549. Células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS por 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% por 30 minutos em temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Análise de Western blot da expressão de ATG5 em lisados de células HeLa do tipo selvagem (WT) e knockdown (KD).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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