Anticorpo policlonal de coelho ASK1 (Phospho-S83)

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para ASK1 (Phospho-S83)
  • Alvo: ASK1 (Fósforo-S83)
  • Fonte/Hospedeiro: Coelho
  • Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino
  • Clonalidade: Policlonal
  • Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
  • Conjugação: Não conjugado
  • Armazenamento: a-20°C
  • Marca:
GATO.NÃO. : APA09952
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Tamanho:
Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco
Detalhes do produto
Plano de fundo
Serina/treonina quinase que atua como um componente essencial da via de transdução de sinal da MAP quinase. Desempenha um papel importante nas cascatas de respostas celulares evocadas por mudanças no ambiente. Media a sinalização para determinação do destino celular, como diferenciação e sobrevivência. Desempenha um papel crucial na via de transdução do sinal de apoptose através da ativação de caspases dependente de mitocôndrias. MAP3K5/ASK1 é necessário para a resposta imune inata, que é essencial para a defesa do hospedeiro contra uma ampla gama de patógenos. Media a transdução de sinais de vários estressores, como o estresse oxidativo, bem como por sinais inflamatórios mediados por receptores, como o fator de necrose tumoral (TNF) ou o lipopolissacarídeo (LPS).
Aplicação
Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB

1:500 - 1:1000

IHQ

1:50 - 1:100

SE/ICC

1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.
Visão geral

Descrição

Anticorpo policlonal de coelho para ASK1 (Phospho-S83)

Especificidade

Reconhece níveis endógenos da proteína ASK1 apenas quando fosforilada em S83.

Tipo de anticorpo

Anticorpo primário

Imunogênio

Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam S83 da proteína ASK1 humana. A sequência exata é proprietária.

Purificação

O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.

Peso molecular

Previsto: 154 kD; Observado: 155 kD

Formulário/Buffer

Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.

Nomes alternativos

PERGUNTAR1; MAPKKK5; MEKK5; proteína quinase quinase quinase 5 ativada por mitógeno; Sinal de apoptose - regulação da quinase 1; PERGUNTAR-1; MAPK/ERK quinase quinase 5; MEK quinase 5; MEKK 5

Símbolo Genético

MAP3K5

Gene Entrez

4217(Humano); 26408 (Rato)

SwissProt

Q99683(Humano); O35099 (Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Dados

Análise de Western blot da expressão de ASK1 (Phospho - S83) em lisados ​​​​de células inteiras Panc1 (A), H1792 (B), H9C2 (C), CT26 (D). (Tamanho de banda previsto: 154 kD; Tamanho de banda observado: 155 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de ASK1 (Phospho - S83) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração ASK1 (Phospho-S83) em células LS8. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Curva de dose-resposta de anticorpo ELISA direta usando Anticorpo Anti-ASK1 (Phospho-S83). A concentração de antígeno (fosfopeptídeo e não fosfopeptídeo) é de 5 ug/ml. Anti-IgG de Cabra-Coelho (H&L) - O HRP foi utilizado como anticorpo secundário e o sinal foi desenvolvido pelo substrato TMB.

Armazenamento
Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.
Nota
Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.
Perguntas frequentes
Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?
Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.
Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?
Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.
O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?
Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.
Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?
A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.
Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?
É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.
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