Anticorpo Policlonal de Coelho AP2 alfa/beta
WB | 1:500 - 1:1000 |
IHQ | 1:100 - 1:200 |
SE/ICC | 1:100 - 1:500 |
Chip | 1:100 - 1:500 |
EMSA | Use em uma diluição dependente do ensaio |
Descrição | Anticorpo policlonal de coelho para AP2 alfa/beta |
Especificidade | Reconhece níveis endógenos de proteína AP2 alfa/beta. |
Tipo de anticorpo | Anticorpo primário |
Imunogênio | Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região C - term de AP2 alfa/beta humano. A sequência exata é proprietária. |
Purificação | O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio. |
Peso molecular | Previsto: 48; Observado: 48 kD |
Formulário/Buffer | Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio. |
Nomes alternativos | TFAP2A; AP2TF; TFAP2; Fator de transcrição AP-2-alfa; AP2-alfa; Fator de transcrição AP-2; Ativando o intensificador-proteína de ligação 2-alfa; Proteína ativadora 2; PA-2; TFAP2B; Fator de transcrição AP-2-beta; AP2-beta; Ativando intensificador-proteína de ligação 2-beta |
Símbolo Genético | TFAP2A; TFAP2B |
Gene Entrez | 7020(Humano); 21418; 21419 (Rato) |
SwissProt | P05549; Q92481(Humano); P34056; Q61313(Rato); P58197(Rato) |
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Análise de Western blot da expressão de AP2 alfa/beta em lisados de células inteiras PC3 (A), MCF7 (B), Myla2059 (C). (Tamanho de banda previsto: 48; 50 kD; Tamanho de banda observado: 48 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração AP2 alfa/beta em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de pulmão humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração AP2 alfa/beta em células HepG2. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

O anticorpo anti-AP2 alfa/beta foi usado em um Ensaio de Mudança de Mobilidade Eletroforética (EMSA) para super deslocar o complexo proteína-DNA. Oligonucleotídeos de DNA de fita dupla radiomarcados (10.000 cpm por pista) abrigando um sítio de ligação para AP2 alfa/beta foram incubados com cada 2 µg de extrato nuclear (NE) de células HeLa e Caski, respectivamente. As amostras foram incubadas por 30 minutos em temperatura ambiente para permitir a formação de complexos proteína-DNA. O anticorpo anti-AP2 alfa/beta foi adicionado às amostras (conforme indicado) e incubado por mais 60 minutos a 4°C. As amostras foram separadas em PAGE a 5,5%. O Gel foi seco sob vácuo e para autorradiografia um filme de raios X foi exposto com uma tela intensificadora por 2 dias a -80°C. Complexos específicos de proteína/DNA foram quantitativamente superdeslocados com Anticorpo Anti-AP2 alfa/beta, verificando a ligação de AP2 alfa/beta ao oligonucleotídeo de DNA.

Análise ChIP de lisado de linhas celulares de câncer cervical, incubado por 12 horas a 4°C. Cross-linking (X-ChIP) usando formaldeído por 10 minutos. Etapa de detecção: PCR semiquantitativa. Controle positivo: Linhas celulares tumorais Hela. Controle negativo: Queratinócitos primários humanos.
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