Anticorpo Policlonal de Coelho AP2 alfa/beta

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para AP2 alfa/beta
  • Alvo: AP2 alfa/beta
  • Fonte/Hospedeiro: Coelho
  • Reatividade: Humano, Rato, Rato, Frango, Porco, Ovelha
  • Clonalidade: Policlonal
  • Aplicações: Banco Mundial, IHC, IF/ICC, ChIP, EMSA
  • Conjugação: Não conjugado
  • Armazenamento: a-20°C
  • Marca:
GATO.NÃO. : APA07624
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Tamanho:
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Detalhes do produto
Plano de fundo
Proteína de ligação a DNA específica de sequência que interage com elementos potenciadores virais e celulares indutíveis para regular a transcrição de genes selecionados. Os fatores AP-2 ligam-se à sequência de consenso 5'-GCCNNNGGC-3' e ativam genes envolvidos em um amplo espectro de funções biológicas importantes, incluindo o desenvolvimento adequado dos olhos, face, parede corporal, membros e tubo neural. Eles também suprimem vários genes, incluindo MCAM/MUC18, C/EBP alfa e MYC. AP-2-alpha é a única proteína AP-2 necessária para a morfogênese inicial da vesícula do cristalino. Juntamente com o coativador CITED2, estimula a ativação da transcrição do promotor PITX2 P1. Associa-se à cromatina à região promotora PITX2 P1.
Aplicação
Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB

1:500 - 1:1000

IHQ

1:100 - 1:200

SE/ICC

1:100 - 1:500

Chip

1:100 - 1:500

EMSA

Use em uma diluição dependente do ensaio

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.
Visão geral

Descrição

Anticorpo policlonal de coelho para AP2 alfa/beta

Especificidade

Reconhece níveis endógenos de proteína AP2 alfa/beta.

Tipo de anticorpo

Anticorpo primário

Imunogênio

Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região C - term de AP2 alfa/beta humano. A sequência exata é proprietária.

Purificação

O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.

Peso molecular

Previsto: 48; Observado: 48 kD

Formulário/Buffer

Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.

Nomes alternativos

TFAP2A; AP2TF; TFAP2; Fator de transcrição AP-2-alfa; AP2-alfa; Fator de transcrição AP-2; Ativando o intensificador-proteína de ligação 2-alfa; Proteína ativadora 2; PA-2; TFAP2B; Fator de transcrição AP-2-beta; AP2-beta; Ativando intensificador-proteína de ligação 2-beta

Símbolo Genético

TFAP2A; TFAP2B

Gene Entrez

7020(Humano); 21418; 21419 (Rato)

SwissProt

P05549; Q92481(Humano); P34056; Q61313(Rato); P58197(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Dados

Análise de Western blot da expressão de AP2 alfa/beta em lisados ​​de células inteiras PC3 (A), MCF7 (B), Myla2059 (C). (Tamanho de banda previsto: 48; 50 kD; Tamanho de banda observado: 48 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração AP2 alfa/beta em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de pulmão humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração AP2 alfa/beta em células HepG2. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

O anticorpo anti-AP2 alfa/beta foi usado em um Ensaio de Mudança de Mobilidade Eletroforética (EMSA) para super deslocar o complexo proteína-DNA. Oligonucleotídeos de DNA de fita dupla radiomarcados (10.000 cpm por pista) abrigando um sítio de ligação para AP2 alfa/beta foram incubados com cada 2 µg de extrato nuclear (NE) de células HeLa e Caski, respectivamente. As amostras foram incubadas por 30 minutos em temperatura ambiente para permitir a formação de complexos proteína-DNA. O anticorpo anti-AP2 alfa/beta foi adicionado às amostras (conforme indicado) e incubado por mais 60 minutos a 4°C. As amostras foram separadas em PAGE a 5,5%. O Gel foi seco sob vácuo e para autorradiografia um filme de raios X foi exposto com uma tela intensificadora por 2 dias a -80°C. Complexos específicos de proteína/DNA foram quantitativamente superdeslocados com Anticorpo Anti-AP2 alfa/beta, verificando a ligação de AP2 alfa/beta ao oligonucleotídeo de DNA.

Análise ChIP de lisado de linhas celulares de câncer cervical, incubado por 12 horas a 4°C. Cross-linking (X-ChIP) usando formaldeído por 10 minutos. Etapa de detecção: PCR semiquantitativa. Controle positivo: Linhas celulares tumorais Hela. Controle negativo: Queratinócitos primários humanos.

Armazenamento
Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.
Nota
Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.
Perguntas frequentes
Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?
Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.
Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?
Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.
O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?
Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.
Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?
A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.
Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?
É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.
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