Anticorpo Policlonal de Coelho AKT (Phospho-T450)

Ficha técnica

FISPQ

AKT (Phospho-T450) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para AKT (Phospho-T450)

Alvo: AKT (Fósforo-T450)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino, Porco, Ovelha
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA09814

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

AKT1 é uma das 3 serina/treonina-proteína quinases intimamente relacionadas (AKT1, AKT2 e AKT3) chamadas de AKT quinase, e que regulam muitos processos, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese, chamadas de AKT quinase, e que regulam muitos processos, incluindo metabolismo, proliferação, sobrevivência celular, crescimento e angiogênese. Isto é mediado pela fosforilação de serina e/ou treonina de uma variedade de substratos a jusante. Mais de 100 candidatos a substratos foram relatados até agora, mas para a maioria deles, nenhuma especificidade de isoforma foi relatada. AKT é responsável pela regulação da captação de glicose mediando a translocação induzida pela insulina do transportador de glicose SLC2A4/GLUT4 para a superfície celular.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para AKT (Phospho-T450)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína AKT somente quando fosforilada em T450.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam T450 da proteína AKT humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 55 kD; Observado: 60 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes Alternativos	PKB; RAC; RAC-alfa serina/treonina-proteína quinase; Proteína quinase B; PKB; Proteína quinase B alfa; PKB alfa; Proto-oncogene c-Akt; RAC-PK-alfa
Símbolo Genético	AKT1
Gene Entrez	207(Humano); 11651(Rato); 24185 (Rato)
SwissProt	P31749(Humano); P31750(Rato); P47196(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de AKT (Phospho-T450) em HEK293T-tratado com fome (A), tratado com A549-EGF (B), tratado com A549-PMA (C), fígado de camundongo (D), pulmão de camundongo (E), fígado de rato (F), pulmão de rato (G) lisados de células inteiras. (Tamanho de banda previsto: 55 kD; Tamanho de banda observado: 60 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de AKT (Phospho - T450) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração AKT (Phospho-T450) em células BV2. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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