Zestaw ludzki FGF - 19 ELISA

Rodzina współczynnika wzrostu fibroblastów (FGF) składa się z co najmniej 22 wysoce konserwowanych białek i występuje u wielu gatunków, od C. elegans i Drosophila po ludzi. FGF to heparyna - Wiązanie czynników wzrostu z domeną FGF rdzenia 120 (AA), która pozwala na wspólną strukturę trzeciorzędową. Zasadniczo FGF są wyrażane podczas rozwoju embrionalnego i w ograniczonych tkankach dorosłych. Działają na komórkach pochodzenia mezodermalnego i neuroektodermalnego, aby regulować różnorodne funkcje fizjologiczne, w tym angiogenezę, wzrost komórek, tworzenie wzorców, regulację metaboliczną, migrację komórek, efekty neurotroficzne i naprawę tkanki. W działaniach rodziny FGF pośredniczy cztery receptory, FGF R1 do FGF R4. Receptory są białkami transbłonowymi z domeną kinazy tyrozynowej i uważa się, że działają jako klasyczne kinazy receptora tyrozynowego. Opisano również FGF R5/FGF RL1, ale brakuje braku domeny kinazy i zdolności sygnalizacji. Human FGF - 19 CDNA przewiduje białko prekursorowe 251 AA z peptydem sygnałowym 22 AA i 229 AA wydzielonym dojrzałym białkiem bez potencjalnych wiązanych miejsc glikozylacji. Dzieli około 50% tożsamości sekwencji AA z myszy i szczura FGF - 15 i 62% tożsamości sekwencji AA z kurczakiem FGF - 19. W przeciwieństwie do większości FGF, które wiążą się i aktywują więcej niż jeden receptor FGF, FGF - 19 wydaje się wiązać tylko FGF R4. Wiązanie receptora jest zdolne do aktywowania kinazy MAP i indukowania promotora prolaktyny. FGF - 19 ma dwa przypuszczalne więzi disiarczkowe, z których jedna jest zachowana w rodzinie FGF. Wyjątkowo ma również rozszerzoną strukturę pętli, która może wpływać na wiązanie siarczanu heparanu. Role funkcjonalne FGF - 19 nadal są wyjaśnione i obejmują aktywność rozwojową, metaboliczną i nowotworową. Podczas embriogenezy pisklęcia wykazano, że FGF - 19 działa synergicznie z Wnt - 8C w celu zainicjowania rozwoju ucha wewnętrznego. Jednak mysz FGF - 19 Ortolog, FGF - 15, nie jest wymagany do tej działalności. FGF - 19 jest również wyrażane w embrionalnym oku z kurczaka, gdzie może odgrywać rolę w rozwoju obiektywu. Pytania dotyczące funkcji ludzkiego FGF - 19 zostały rozwiązane przy użyciu wyrażenia ektopowego. Transgeniczna ponad - ekspresja ludzkiego FGF - 19 u myszy powoduje tworzenie guza, zwiększone wydatki energetyczne, zmniejszoną otyłość i odporność na przyrost masy ciała w odpowiedzi na dietę o wysokiej zawartości tłuszczu. Podobne skutki zaobserwowano u myszy leczonych dożylnie rekombinowanym FGF - 19.

PG/ML	O.D.		Przeciętny	Poprawione
0.00	0.0350	0.0324	0.0337
15.63	0.1448	0.1364	0.1406	0.1069
31.25	0.2449	0.2436	0.2443	0.2106
62.50	0.4563	0.4771	0.4667	0.4330
125.00	0.8452	0.8358	0.8405	0.8068
250.00	1.6070	1.5490	1.5780	1.5443
500.00	2.8150	2.8420	2.8285	2.7948
1000.00	4.1933	4.2275	4.2104	4.1767

	Intra - Precyzja testu				Inter - Precyzja testu
Numer próbki	S1	S2	S3		S1	S2	S3
	22	22	22		6	6	6
Średni （PG/ML）	22.6	111.5	323.0		22.1	109.5	329.4
Odchylenie standardowe	1.4	4.5	11.3		0.5	2.6	12.7
Współczynnik zmienności （%）	6.3	4.0	3.5		2.1	2.4	3.9

Intra - Precyzja testu (precyzja w teście) Trzy próbki znanego stężenia zostały przetestowane dwadzieścia razy na jednej płycie w celu oceny precyzji testu.

Między -

Odzyskiwanie skoków oceniono, zwiększając 3 poziomy ludzkiego FGF - 19 do zdrowia ludzkiej próbki surowicy. W tym eksperymencie użyto w tym eksperymencie surowicę niesklasyfikowaną.

Odzyskiwanie wahało się od 86% do 107% przy ogólnym średniej odzyskiwaniu 98%.

Matryca próbki	Próbka Oceniane	Zakres (PG/ML)	Wykrywalne %	Średnia wykrywalna (PG/ML)
Serum	30	19,81 - 294,45	100	91.01

Surowica/osocza - trzydzieści próbek pozornie zdrowych ochotników oceniono pod kątem obecności FGF - 19 w tym teście. Darczyńców nie było dostępnych historii medycznych.