Zestaw ekstrakcji i oczyszczania egzosomu (surowica - plazma)

Egzosomy to małe pęcherzyki (30 - 150 nm) zawierające RNA i białko wydzielane przez komórki, które są obfite w surowicy/osoczu. Uważa się, że egzosomy mają funkcję przekaźnika między komórkowego, przenosząc ich efektory lub cząsteczki sygnału między specyficzne komórki.

W biologicznym badaniu funkcjonalnym egzosomu konieczne jest oddzielenie jego pełnych cząstek. Zestaw szybkiego ekstrakcji egzosomu w surowicy/osoczu niezależnie rozwinięty przez Umibiois odpowiedni do ekstrakcji egzosomu w surowicy/osoczu po optymalizacji składników. Pomaga uzyskać Wysoka czystość Cząstki egzosomalne szybko i wydajnie.

Wirówka o dużej prędkości (z prędkością obrotową do 12000 rpm), oscylator wirowy; 1,5 ml rurki odśrodkowej, roztwór bufora PBS, maszyna do lodowej.

* Nuclease - bezpłatny, sterylny

• · Obejmuje supernatant komórek, tkankę, mocz, surowicę, plazmę, mleko itp.
• · Wysoka zdolność przetwarzania próbek, do 5 razy większa niż podobnych produktów.
• · Egzosomy mogą być używane do badań CEL CO - CULTY I OMICS.
• · Dedykowany do ciągłej optymalizacji zestawów egzosomów do badań i rozwoju.
• · Zaufane przez ponad 300 klientów, zapewniając zmartwienie - Bezpłatne zakupy i korzystanie.
• · Koszt - Skuteczne wspieranie badań w skali podczas oszczędzania kosztów.

I. Przykładowa wstępna obróbka

1. Przed użyciem wirówki powinna być wstępnie schłodzona przez 10 minut w 4 ℃;

2. Pobieranie próbek: W przypadku zamrożonej próbki rozmrożą po 2 - 8 ℃ po wyjęciu z lodówki; W przypadku nowej próbki przechowuj ją na 2 - 8 ℃ po zebraniu.

3. Sub - Pakuj próbkę według 500 μl /rurkę i tworzy niewystarczającą część do 500 μl z 1 × PBS.

II Nieczyste usuwanie białka

1. Po wyjmowaniu Rozwiązanie a Z zestawu umieść go w warstwie zamrażarki lodówki na co najmniej 1 godzinę. Wyjmij przed - chłodzone rozwiązanie a i umieść je na zuchwałości;

2. Dodanie Rozwiązanie a: Dodaj 400 μl przed - chłodzone rozwiązanie a do 500 μl próbki krwi i natychmiast zaciska rurkę odśrodkową i całkowicie wymieszaj ją za pomocą oscylatora wiru przez 30 sekund;

3. Odwirowanie w celu usunięcia białka: wirować równomiernie mieszaną próbkę przy 4 ℃ przy 12000 rpm przez 20 minut w celu usunięcia białka nieczystego w próbce;

4. Przenoszenie supernatantu: Przenieś supernatantu odwirowanego, którego nieczyste białka zostały usunięte do nowej 1,5 ml rurki odśrodkowej;

III Ekstrakcja egzosomu

1. Dodanie Rozwiązanie b: Dodaj 120μl Rozwiązanie b do odwirowanego supernatantu, którego nieczyste białka zostały usunięte;

2. Mieszanie rozwiązania: Po dodaniu Rozwiązanie b, mocno przykryj rurkę odśrodkową i w pełni wymieszaj za pomocą oscylatora wiru przez 2 min. Następnie pozwól mu stać przez 5 minut w temperaturze pokojowej;

3. Wytrącanie egzosomu: wirowanie rurki odśrodkowej z mieszanym roztworem przy 4 ℃ przy 12000 rpm przez 15 minut i odrzuć supernatant;

4. Ponowne odśrodki: wirowanie rurki odśrodkowej z opadami przy 4 ℃ przy 12000 rpm przez 2 minuty i odrzuć supernatant (Uwaga: supernatant będzie ssany jak najwięcej). Pozostaw 1,5 ml rurki odśrodkowej otwarte w temperaturze pokojowej Do 10 min;

5. Ponowne zawieszanie egzosomu: weź 200 μl 1 × PBS i równomiernie obróć odwirowany osad. Po rozpuszczeniu przenieś ponowne roztwór do nowej 1,5 ml rurki odśrodkowej;

6. Uzyskanie cząstek egzosomalnych: wirówka 1,5 ml rurki odśrodkowej z ponownie zawieszonym roztworem przy 4 ℃ przy 12000 rpm przez 2 min i zachowaj supernatant. Ten supernatant jest bogaty w cząstki egzosomalne.

(Uwaga: W tym momencie może istnieć duża ilość osadów, co jest normalnym zjawiskiem)

IV Oczyszczanie egzosomu

1. Oczyszczanie egzosomu: przenieś uzyskany surowy produkt cząstek egzosomalnych do górnej komory filtra oczyszczania egzosomu (Kolumna EPF) i wirowanie przy 4 ℃ przy 5600 obr / min przez 20 minut. Po odwirowaniu zbierz płyn na dole kolumny EPF. Ten płyn jest oczyszczonymi cząstkami egzosomalnymi; (Uwaga: kolumny EPF nie są wielokrotnego użytku)

2. Przechowywanie egzosomu: Oczyszczone egzosomy powinny być pod - pakowane w 50 - 100 μl i przechowywane w lodówce o niskiej -

V Warunki przechowywania

Po otrzymaniu produktu osobno przechowuj odczynniki. Proszę dokładnie wymieszać przed użyciem.

Rozwiązanie A: Transport w temperaturze pokojowej i przechowuj w - 18 ℃ po otwarciu zestawu (warstwa zamrażarki konwencjonalnej lodówki);

Rozwiązanie B: przechowuj w temperaturze pokojowej;

Kolumna EPF: przechowuj w temperaturze pokojowej;

V Środki ostrożności

Ten produkt jest przeznaczony tylko do nauki o życiu!

Vi inne przedmioty

Aby uzyskać więcej pytań technicznych, skontaktuj się z Umibio w celu uzyskania dalszych odpowiedzi.