Wprowadzenie do technologii ELISA

Enzym - Połączony test immunosorbent (ELISA) jest szeroko stosowaną techniką analityczną w biologii molekularnej i immunologii do ilościowego pomiaru określonych białek w różnych próbkach biologicznych. Próbki te mogą obejmować surowicę, osocza, supernatanty hodowli komórkowej, lizaty moczu i tkanki. AREX Biosciences jest zaangażowany w dostarczanie wysokiej jakości zestawów ELISA, które ułatwiają wykrywanie i kwantyfikację docelowych białek o wyjątkowej specyficzności i wrażliwości. Nasze innowacyjne rozwiązania zaspokajają potrzeby badaczy i klinicystów, co czyni je bezcennymi zarówno w zastosowaniach badawczych, jak i klinicznych.

Przegląd metodologii ELISA

Proces ELISA obejmuje kilka kluczowych kroków w celu dokładnego pomiaru białek docelowych. Początkowo specyficzne przeciwciało do przechwytywania jest unieruchomione na płytce 96 - Zgodnie z tym standardy i próbki są dodawane do studni, gdzie białko docelowe wiąże się z unieruchomionym przeciwciałem. Następnie studzienki są myte w celu usunięcia niezwiązanych substancji, a następnie dodanie biotynylowanego przeciwciała wykrywalnego, które specyficznie rozpoznaje docelowe białko. Po kolejnym etapie mycia dodaje się streptawidyna HRP -, aby ułatwić wykrycie.

Rozwój sygnału

Po dodaniu streptawidyny sprzężonej HRP - studnie ulegają ostatecznemu przemyciu przed wprowadzeniem roztworu podłoża TMB. Podłoże reaguje z enzymem HRP, aby uzyskać kolor bezpośrednio proporcjonalny do ilości docelowego białka związanego ze studzienkami. Ten rozwój kolorów jest kluczowym aspektem testu, umożliwiając naukowcom skuteczną wizualizację i ilościowo kwantyfikację białka docelowego. AREX zapewnia, że ​​wszystkie komponenty w zestawach ELISA są zoptymalizowane pod kątem wiarygodnej wydajności, przyczyniając się do dokładnych wyników analizy białek.

Rodzaje ELISA

Istnieją cztery główne typy ELISA: bezpośrednie, pośrednie, kanapki i konkurencyjne, każdy z wyraźnymi zaletami i wadami.

• Bezpośrednia ELISA: W tym typie antygen jest unieruchomiony na płycie, a sprzężone przeciwciało wykrywalne wiąże się bezpośrednio z nim. Ta metoda jest szybka i prosta, ale mniej specyficzna ze względu na zastosowanie tylko jednego przeciwciała.
• Pośrednia ELISA: Ta zmiana obejmuje dodatkowy etap wykrywania amplifikacji, w którym najpierw dodaje się nieskonjugowane przeciwciało pierwotne, a następnie sprzężone przeciwciało wtórne. Takie podejście pozwala na wzmocnienie sygnału, ale może wprowadzić potencjalną reaktywność krzyżową.
• Sandwich ELISA: Najczęstszy typ, ta metoda wykorzystuje dwa przeciwciała do „kanapki” antygenu. Oferuje najwyższą specyficzność i wrażliwość, ale obejmuje dłuższy protokół i może być trudniejszy do rozwoju. Zestawy ELISA z kanapkami AREX zostały zaprojektowane w celu maksymalizacji wydajności, zapewniając badaczom niezawodne narzędzie do ich analiz.