마우스 IL-1β ELISA 키트
배경
인터루킨 1(IL-1) 단백질 계열은 IL-1 알파, IL-1 베타 및 IL-1 수용체 길항제(IL-1ra)로 구성됩니다. IL-1 알파와 IL-1 베타는 동일한 세포 표면 수용체에 결합하고 생물학적 기능을 공유합니다. IL-1은 피부 각질세포, 일부 상피 세포 및 중추신경계의 특정 세포를 제외하고 건강한 개인의 자극되지 않은 세포에서는 생성되지 않습니다. 그러나 염증성 물질, 감염 또는 미생물 내독소에 반응하여 대식세포 및 기타 다양한 세포 유형에 의한 IL-1 생산이 급격히 증가하는 것으로 나타났습니다. IL-1 베타는 면역 및 염증 반응, 뼈 재형성, 발열, 탄수화물 대사 및 GH/IGF-I 생리학에서 중심 역할을 합니다. IL-1의 부적절하거나 장기간 생산은 패혈증, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환, 급성 및 만성 골수성 백혈병, 인슐린 의존성 당뇨병, 죽상경화증, 신경 손상 및 노화 관련 질병을 비롯한 다양한 병리학적 상태와 관련이 있습니다.
IL-1 알파 및 IL-1 베타는 아미노산(aa) 수준에서 약 25% 상동성을 나타내는 구조적으로 관련된 폴리펩티드입니다. 둘 다 31kDa 전구체로 합성되며 이후 약 17.5kDa의 성숙한 단백질로 절단됩니다. Caspase-1/ICE에 의한 IL-1 베타 전구체의 절단은 염증 반응의 핵심 단계입니다. IL-1 알파와 IL-1 베타 모두 일반적인 소수성 신호 펩타이드를 포함하지 않지만 이러한 인자가 비고전적 경로에 의해 분비될 수 있다는 증거가 있습니다. 처리되지 않은 IL-1 알파의 일부는 세포막에 존재할 수 있으며 생물학적 활성을 유지할 수 있습니다. IL-1 베타의 전구체 형태는 IL-1 알파 전구체와 달리 가공된 형태에 비해 생물학적 활성이 거의 또는 전혀 나타나지 않습니다. IL-1 베타의 처리되지 않은 형태와 성숙한 형태 모두 세포에서 내보내집니다.
IL-1 알파 및 IL-1 베타는 추가로 IL-1ra에 결합하는 면역글로불린 수퍼패밀리 수용체를 통해 효과를 발휘합니다. 80 kDa 막횡단 유형 I 수용체(IL-1 RI)는 T 세포, 섬유모세포, 각질세포, 내피 세포, 윤활막 세포, 연골 세포 및 간세포에서 발현됩니다. 68 kDa 막횡단 유형 II 수용체(IL-1 RII)는 B 세포, 호중구 및 골수 세포에서 발현됩니다. 두 가지 IL-1 수용체 유형은 세포외 도메인에서 약 28%의 상동성을 나타내지만 유형 II 수용체의 세포질 도메인은 29 aa에 불과한 반면, 유형 I 수용체의 세포질 도메인은 213 aa라는 점에서 크게 다릅니다. IL-1 RII는 IL-1에 반응하여 신호를 보내는 것으로 보이지 않으며 IL-1 기능을 약화시키는 미끼 수용체로 기능할 수 있습니다. IL-1 수용체 보조 단백질(IL-1 RAcP)은 IL-1 RI와 결합하며 IL-1 RI 신호 전달에 필요합니다. IL-1ra는 IL-1의 경쟁적 억제제로 기능하는 분비 분자입니다. IL-1 RI 및 IL-1 RII의 가용성 형태는 인간 혈장, 윤활액 및 여러 인간 세포주의 조정 배지에서 검출되었습니다. 또한 가용성 IL-1 RII와 유사한 IL-1 결합 단백질은 백시니아 및 우두 바이러스에 의해 암호화됩니다.
IL-1 알파 및 IL-1 베타는 아미노산(aa) 수준에서 약 25% 상동성을 나타내는 구조적으로 관련된 폴리펩티드입니다. 둘 다 31kDa 전구체로 합성되며 이후 약 17.5kDa의 성숙한 단백질로 절단됩니다. Caspase-1/ICE에 의한 IL-1 베타 전구체의 절단은 염증 반응의 핵심 단계입니다. IL-1 알파와 IL-1 베타 모두 일반적인 소수성 신호 펩타이드를 포함하지 않지만 이러한 인자가 비고전적 경로에 의해 분비될 수 있다는 증거가 있습니다. 처리되지 않은 IL-1 알파의 일부는 세포막에 존재할 수 있으며 생물학적 활성을 유지할 수 있습니다. IL-1 베타의 전구체 형태는 IL-1 알파 전구체와 달리 가공된 형태에 비해 생물학적 활성이 거의 또는 전혀 나타나지 않습니다. IL-1 베타의 처리되지 않은 형태와 성숙한 형태 모두 세포에서 내보내집니다.
IL-1 알파 및 IL-1 베타는 추가로 IL-1ra에 결합하는 면역글로불린 수퍼패밀리 수용체를 통해 효과를 발휘합니다. 80 kDa 막횡단 유형 I 수용체(IL-1 RI)는 T 세포, 섬유모세포, 각질세포, 내피 세포, 윤활막 세포, 연골 세포 및 간세포에서 발현됩니다. 68 kDa 막횡단 유형 II 수용체(IL-1 RII)는 B 세포, 호중구 및 골수 세포에서 발현됩니다. 두 가지 IL-1 수용체 유형은 세포외 도메인에서 약 28%의 상동성을 나타내지만 유형 II 수용체의 세포질 도메인은 29 aa에 불과한 반면, 유형 I 수용체의 세포질 도메인은 213 aa라는 점에서 크게 다릅니다. IL-1 RII는 IL-1에 반응하여 신호를 보내는 것으로 보이지 않으며 IL-1 기능을 약화시키는 미끼 수용체로 기능할 수 있습니다. IL-1 수용체 보조 단백질(IL-1 RAcP)은 IL-1 RI와 결합하며 IL-1 RI 신호 전달에 필요합니다. IL-1ra는 IL-1의 경쟁적 억제제로 기능하는 분비 분자입니다. IL-1 RI 및 IL-1 RII의 가용성 형태는 인간 혈장, 윤활액 및 여러 인간 세포주의 조정 배지에서 검출되었습니다. 또한 가용성 IL-1 RII와 유사한 IL-1 결합 단백질은 백시니아 및 우두 바이러스에 의해 암호화됩니다.
일반적인 데이터
|
pg/ml |
외경 |
평균 |
수정됨 |
|
|
0.00 |
0.0651 |
0.0701 |
0.0676 |
|
|
15.63 |
0.1104 |
0.1143 |
0.1124 |
0.0448 |
|
31.25 |
0.1660 |
0.1609 |
0.1635 |
0.0959 |
|
62.50 |
0.2623 |
0.2676 |
0.2650 |
0.1974 |
|
125.00 |
0.4740 |
0.4650 |
0.4695 |
0.4019 |
|
250.00 |
0.8593 |
0.8316 |
0.8455 |
0.7779 |
|
500.00 |
1.5070 |
1.6060 |
1.5565 |
1.4889 |
|
1000.00 |
2.7780 |
2.8080 |
2.7930 |
2.7254 |
정밀도
|
분석 내 정밀도 |
분석 간 정밀도 |
|||||
|
샘플 번호 |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
평균(pg/ml) |
18.9 |
93.0 |
290.2 |
17.4 |
97.5 |
280.7 |
|
표준편차 |
1.0 |
4.5 |
16.9 |
2.3 |
8.5 |
14.6 |
|
변동계수(%) |
5.3 |
4.9 |
5.8 |
6.1 |
6.1 |
5.7 |
분석 간 정밀도(분석 간 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 한 플레이트에서 6회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
스파이크 복구
스파이크 회복은 마우스 IL-1 베타의 3가지 수준을 건강 마우스 혈청 샘플에 스파이킹하여 평가했습니다. 본 실험에서는 스파이킹되지 않은 혈청을 블랭크로 사용하였다.
회수율은 81%~111%였으며 전체 평균 회수율은 98%였습니다.
회수율은 81%~111%였으며 전체 평균 회수율은 98%였습니다.
샘플 값
| 샘플 매트릭스 | 샘플 평가됨 | 범위(pg/ml) | 감지 가능(%) | 검출 평균(pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| 혈청 | 30 | n.d.-3.66 | 13 | 1.08 |
혈청/혈장 – 이 분석에서는 겉보기에 건강한 쥐로부터 채취한 30개의 샘플을 대상으로 IL-1β의 존재 여부를 평가했습니다. 기증자에 대한 병력이 없습니다. n.d. =-검출할 수 없습니다. 감도 이하로 측정된 샘플은 검출 불가능한 것으로 간주됩니다.
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