인간 IL-1RA/IL-1F3 ELISA 키트

주요 기능 및 세부정보

  • 사양: 96 테스트
  • 감도: 0.09pg/ml(50μl); 0.15pg/ml(10μl);
  • 표준 곡선 범위: 2.74~2000pg/ml
  • 표준 곡선 기울기: 7점/3접기
  • 배양 횟수: 2
  • 샘플량: 50μl/10μl
  • 분석 유형: 샌드위치 엘리사
  • 작동 기간: 120분
  • 브랜드:
카탈로그 번호 : AEH0177
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크기:
96T
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제품 세부정보
배경

인터루킨-1 수용체 길항제(IL-1ra; IL-1F3으로도 알려짐)는 IL-1 사이토카인 계열의 22-25 kDa 구성원입니다. 현재 11개의 계열 구성원(IL-1F1-F11)이 있으며 그 중 9개는 인간 Ch2에서 IL-1 유전자 클러스터를 형성합니다. 각 IL-1 계열 구성원에는 IL-1 접기가 포함되어 있습니다. 이 접힘은 -베타 세엽 구조를 형성하기 위해 상호 작용하는 12개의 꽉 찬 베타 시트에 의해 생성됩니다. 이 구조를 달성하려면 아미노산(aa) 상동성이 거의 필요하지 않으며 이는 IL-1 계열 구성원 간의 낮은 aa 동일성을 설명합니다. IL-1ra는 신호 전달 활성이 없는 순수 사이토카인 수용체 길항제입니다. 염증을 완화하기 위해 존재하는 급성기 단백질입니다. IL-1(베타)는 초기에 다양한 자극에 반응하여 단핵구에 의해 생성됩니다. 순환하는 IL-1은 광범위하게 발현되는 IL-1 유형 I 수용체(IL-1 RI)에 결합하여 수많은 염증 유발 사건을 시작합니다. 내피 세포(EC)에서 IL-1은 PGE2 및 IL-6 방출을 유도하여 발열, 혈소판 증가증 및 간 급성기 단백질 생성을 유발합니다. 윤활관절에서 IL-1은 연골세포 NO 생성을 유도하는데, 이는 콜라겐 합성 감소와 연골세포 세포사멸을 초래합니다. 마지막으로 IL-1은 혈액과 조직 모두에서 호중구 수를 증가시켜 여러 위치에서 염증 유발 환경을 촉진할 수 있습니다. IL-1ra는 경쟁적 억제를 통해 IL-1 작용을 차단합니다. 더 정확하게 말하면, IL-1ra는 IL-1 RI의 IL-1 결합 부위를 채우지만 신호를 전달하는 IL-1 RI:IL-1 R 보조 단백질(IL-1 R AcP) 이종이량체 복합체의 생성을 조율할 수도 없습니다. 효과적인 IL-1ra 농도는 일반적으로 국소 IL-1 농도보다 100-배 더 높습니다. 이는 IL-1ra 반감기가 6분에 불과하고 세포 반응을 유도하기 위해 IL-1에 의해 관여해야 하는 IL-1 유형 I 수용체가 거의 없기 때문입니다.

인간 IL-1ra는 25 aa 신호 서열과 152 aa 성숙 영역을 포함하는 177 aa 전구체로 합성됩니다. 이는 IL-1 사이토카인 접힘을 포함하지만 IL-1 수용체 이종이량체의 활성화를 허용하는 두 개의 구조적 모티프가 분명히 부족합니다. 첫째, IL-1 RI에 결합한 후 성숙 분자의 Ile 51-His 54 및 Lys 145가 존재하면 IL-1 R AcP가 동원되지 않습니다. 둘째, 보조 신호 구성 요소를 모집하는 데 도움이 되는 것으로 가정되는 식별 가능한 C-말단 렉틴 세그먼트가 없습니다. 성숙한 인간 IL-1ra는 마우스 및 개 IL-1ra와 각각 77% 및 82% aa 동일하며, 인간 IL-1ra는 마우스 세포에서 IL-1 활성을 억제합니다. 단핵구, 세르톨리 세포, 간세포, 지방세포, 윤활막 섬유아세포, 비만 세포, 췌장 베타 세포 및 장 상피 세포를 포함한 다양한 세포 유형이 IL-1ra를 발현합니다. 적어도 3개의 세포내 IL-1ra 이소형(icIL-1ra1, 2 및 3)이 있습니다. 모두 N-말단 변이를 나타내며 모두 분비된 전구체의 아미노산 35-177을 포함합니다. 세포내 IL-1ra1은 내피 세포에 의해 "분비"되고 길항제 방식으로 IL-1 RI에 결합하는 것으로 보고되었기 때문에 특히 중요합니다. 세포내 IL-1ra1의 길이는 159 aa이며 IL-1ra 신호 서열의 처음 21 aa에 대한 3 aa 치환을 보여줍니다.

일반적인 데이터

pg/ml

외경

평균

수정됨

0.00

0.0625

0.0611

0.0618

2.74

0.0946

0.1014

0.0980

0.0362

8.23

0.1404

0.1366

0.1385

0.0767

24.69

0.2081

0.1979

0.2030

0.1412

74.07

0.3790

0.3737

0.3764

0.3146

222.22

0.9861

0.9935

0.9898

0.9280

666.67

2.1300

2.1710

2.1505

2.0887

2000.00

3.6470

3.7770

3.7120

3.6502

정밀도

분석 내 정밀도

분석 간 정밀도

샘플 번호

S1

S2

S3

S1

S2

S3

22

22

22

6

6

6

평균(pg/ml)

37.9

190.5

584.1

42.1

208.8

611.7

표준편차

2.8

12.1

37.9

1.9

14.5

41.6

변동계수(%)

7.4

6.3

6.5

5.3

4.2

4.6

분석 내 정밀도(분석 내 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 하나의 플레이트에서 20회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
분석 간 정밀도(분석 간 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 한 플레이트에서 6회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
스파이크 복구
스파이크 회복은 인간 IL-1RA의 3가지 수준을 건강한 인간 혈청 샘플에 스파이킹하여 평가되었습니다. 본 실험에서는 스파이킹되지 않은 혈청을 블랭크로 사용하였다.
회수율은 85%~109%였으며 전체 평균 회수율은 98%였습니다.
샘플 값
샘플 매트릭스 샘플 평가됨 범위(ng/ml) 감지 가능(%) 검출 가능 평균(ng/ml)
혈청 30 6.34-126.18 100 33.78

혈청/혈장 – 겉보기에 건강한 지원자로부터 얻은 30개의 샘플을 통해 이 분석에서 IL-1RA의 존재 여부를 평가했습니다. 기증자에 대한 병력이 없습니다.

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