인간 IL-1RA/IL-1F3 ELISA 키트
인터루킨-1 수용체 길항제(IL-1ra; IL-1F3으로도 알려짐)는 IL-1 사이토카인 계열의 22-25 kDa 구성원입니다. 현재 11개의 계열 구성원(IL-1F1-F11)이 있으며 그 중 9개는 인간 Ch2에서 IL-1 유전자 클러스터를 형성합니다. 각 IL-1 계열 구성원에는 IL-1 접기가 포함되어 있습니다. 이 접힘은 -베타 세엽 구조를 형성하기 위해 상호 작용하는 12개의 꽉 찬 베타 시트에 의해 생성됩니다. 이 구조를 달성하려면 아미노산(aa) 상동성이 거의 필요하지 않으며 이는 IL-1 계열 구성원 간의 낮은 aa 동일성을 설명합니다. IL-1ra는 신호 전달 활성이 없는 순수 사이토카인 수용체 길항제입니다. 염증을 완화하기 위해 존재하는 급성기 단백질입니다. IL-1(베타)는 초기에 다양한 자극에 반응하여 단핵구에 의해 생성됩니다. 순환하는 IL-1은 광범위하게 발현되는 IL-1 유형 I 수용체(IL-1 RI)에 결합하여 수많은 염증 유발 사건을 시작합니다. 내피 세포(EC)에서 IL-1은 PGE2 및 IL-6 방출을 유도하여 발열, 혈소판 증가증 및 간 급성기 단백질 생성을 유발합니다. 윤활관절에서 IL-1은 연골세포 NO 생성을 유도하는데, 이는 콜라겐 합성 감소와 연골세포 세포사멸을 초래합니다. 마지막으로 IL-1은 혈액과 조직 모두에서 호중구 수를 증가시켜 여러 위치에서 염증 유발 환경을 촉진할 수 있습니다. IL-1ra는 경쟁적 억제를 통해 IL-1 작용을 차단합니다. 더 정확하게 말하면, IL-1ra는 IL-1 RI의 IL-1 결합 부위를 채우지만 신호를 전달하는 IL-1 RI:IL-1 R 보조 단백질(IL-1 R AcP) 이종이량체 복합체의 생성을 조율할 수도 없습니다. 효과적인 IL-1ra 농도는 일반적으로 국소 IL-1 농도보다 100-배 더 높습니다. 이는 IL-1ra 반감기가 6분에 불과하고 세포 반응을 유도하기 위해 IL-1에 의해 관여해야 하는 IL-1 유형 I 수용체가 거의 없기 때문입니다.
인간 IL-1ra는 25 aa 신호 서열과 152 aa 성숙 영역을 포함하는 177 aa 전구체로 합성됩니다. 이는 IL-1 사이토카인 접힘을 포함하지만 IL-1 수용체 이종이량체의 활성화를 허용하는 두 개의 구조적 모티프가 분명히 부족합니다. 첫째, IL-1 RI에 결합한 후 성숙 분자의 Ile 51-His 54 및 Lys 145가 존재하면 IL-1 R AcP가 동원되지 않습니다. 둘째, 보조 신호 구성 요소를 모집하는 데 도움이 되는 것으로 가정되는 식별 가능한 C-말단 렉틴 세그먼트가 없습니다. 성숙한 인간 IL-1ra는 마우스 및 개 IL-1ra와 각각 77% 및 82% aa 동일하며, 인간 IL-1ra는 마우스 세포에서 IL-1 활성을 억제합니다. 단핵구, 세르톨리 세포, 간세포, 지방세포, 윤활막 섬유아세포, 비만 세포, 췌장 베타 세포 및 장 상피 세포를 포함한 다양한 세포 유형이 IL-1ra를 발현합니다. 적어도 3개의 세포내 IL-1ra 이소형(icIL-1ra1, 2 및 3)이 있습니다. 모두 N-말단 변이를 나타내며 모두 분비된 전구체의 아미노산 35-177을 포함합니다. 세포내 IL-1ra1은 내피 세포에 의해 "분비"되고 길항제 방식으로 IL-1 RI에 결합하는 것으로 보고되었기 때문에 특히 중요합니다. 세포내 IL-1ra1의 길이는 159 aa이며 IL-1ra 신호 서열의 처음 21 aa에 대한 3 aa 치환을 보여줍니다.
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pg/ml |
외경 |
평균 |
수정됨 |
|
|
0.00 |
0.0625 |
0.0611 |
0.0618 |
|
|
2.74 |
0.0946 |
0.1014 |
0.0980 |
0.0362 |
|
8.23 |
0.1404 |
0.1366 |
0.1385 |
0.0767 |
|
24.69 |
0.2081 |
0.1979 |
0.2030 |
0.1412 |
|
74.07 |
0.3790 |
0.3737 |
0.3764 |
0.3146 |
|
222.22 |
0.9861 |
0.9935 |
0.9898 |
0.9280 |
|
666.67 |
2.1300 |
2.1710 |
2.1505 |
2.0887 |
|
2000.00 |
3.6470 |
3.7770 |
3.7120 |
3.6502 |
|
분석 내 정밀도 |
분석 간 정밀도 |
|||||
|
샘플 번호 |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
평균(pg/ml) |
37.9 |
190.5 |
584.1 |
42.1 |
208.8 |
611.7 |
|
표준편차 |
2.8 |
12.1 |
37.9 |
1.9 |
14.5 |
41.6 |
|
변동계수(%) |
7.4 |
6.3 |
6.5 |
5.3 |
4.2 |
4.6 |
분석 간 정밀도(분석 간 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 한 플레이트에서 6회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
회수율은 85%~109%였으며 전체 평균 회수율은 98%였습니다.
| 샘플 매트릭스 | 샘플 평가됨 | 범위(ng/ml) | 감지 가능(%) | 검출 가능 평균(ng/ml) |
|---|---|---|---|---|
| 혈청 | 30 | 6.34-126.18 | 100 | 33.78 |
혈청/혈장 – 겉보기에 건강한 지원자로부터 얻은 30개의 샘플을 통해 이 분석에서 IL-1RA의 존재 여부를 평가했습니다. 기증자에 대한 병력이 없습니다.
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