인간 CTLA-4 ELISA 키트
배경
CTLA-4(세포독성 T-림프구-4, CD152로 지정)는 Ig 슈퍼패밀리의 구성원인 I형 막횡단 T 세포 억제 분자입니다. 인간 또는 마우스 CTLA-4 cDNA는 35 aa 신호 서열, 1개의 Ig-유사 V- 유형 도메인이 있는 126 aa 세포외 도메인(ECD), 21 aa 막횡단(TM) 서열 및 41 aa 세포질 서열을 포함하여 223개의 아미노산(aa)을 인코딩합니다. 이는 41-43 kDa의 공유 동종이량체로 발견됩니다. ECD 내에서 인간 CTLA-4는 마우스, 쥐 및 돼지/소/토끼/고양이/개 CTLA-4와 각각 68%, 71% 및 83-86%의 aa 서열 동일성을 공유합니다. TM과 세포질 서열(sCTLA-4)이 없는 174 aa 형태가 분비될 가능성이 있습니다. 주로 세포질 도메인의 일부를 포함하는 56-79 aa의 이소형이 보고되었습니다. 마우스에서 Ig-유사 도메인이 결여된 이소형은 리간드 독립적인 억제 활성을 가지며 liCTLA-4라고 합니다. CTLA-4와 구조적으로 관련된 CD28은 naive T 세포에서 구성적으로 발현되며 면역학적 시냅스(IS) 내의 항원 제시 세포(APC)에서 B7-2와 결합할 때 T 세포 활성화를 촉진합니다. 대조적으로, CTLA-4는 T 세포 활성화 후 1, 2일 후에 세포내 소포에서 IS로 모집됩니다. 이는 APC에서 B7-1과 선형 격자를 형성하여 음성 조절 신호를 유도하고 T 세포 활성화를 종료합니다. 치료용 인간 CTLA-4-Ig 융합 단백질(상표명 Orencia)인 아바타셉트는 B7-1 및 B7-2 결합에 대해 CD28과 경쟁하며 자가면역 상태에서 T 세포 활성화를 길항하고 이식 생존을 향상시키는 데 사용되어 왔습니다. CTLA-4가 삭제된 마우스는 출생 후까지 아무런 이상도 나타내지 않지만 야생형 마우스와 인간에서 CTLA-4를 구성적으로 발현하는 조절 T 세포의 지속적인 T 세포 활성화 및 제어 불량으로 인해 치명적인 자가면역 반응이 발생합니다.
일반적인 데이터
|
pg/ml |
외경 |
평균 |
수정됨 |
|
|
0.00 |
0.0105 |
0.0103 |
0.0104 |
|
|
2.74 |
0.0171 |
0.0159 |
0.0165 |
0.0061 |
|
8.23 |
0.0282 |
0.0271 |
0.0277 |
0.0173 |
|
24.69 |
0.0616 |
0.0611 |
0.0614 |
0.0510 |
|
74.07 |
0.1683 |
0.1480 |
0.1582 |
0.1478 |
|
222.22 |
0.5143 |
0.4790 |
0.4967 |
0.4863 |
|
666.67 |
1.5540 |
1.5790 |
1.5665 |
1.5561 |
|
2000.00 |
3.9590 |
3.9100 |
3.9345 |
3.9241 |
정밀도
|
분석 내 정밀도 |
분석 간 정밀도 |
|||||
|
샘플 번호 |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
평균(pg/ml) |
53.1 |
266.2 |
814.9 |
17.2 |
77.5 |
231.4 |
|
표준편차 |
2.9 |
9.1 |
34.8 |
1.3 |
5.1 |
12.0 |
|
변동계수(%) |
5.5 |
3.4 |
4.3 |
7.8 |
6.6 |
5.2 |
분석 간 정밀도(분석 간 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 한 플레이트에서 6회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
스파이크 복구
스파이크 회복은 건강한 인간 혈청 샘플에 3가지 수준의 인간 CTLA-4를 스파이킹하여 평가되었습니다. 본 실험에서는 스파이킹되지 않은 혈청을 블랭크로 사용하였다.
회수율은 91%~97%였으며 전체 평균 회수율은 94%였습니다.
회수율은 91%~97%였으며 전체 평균 회수율은 94%였습니다.
샘플 값
| 샘플 매트릭스 | 샘플 평가됨 | 범위(pg/ml) | 감지 가능(%) | 검출 평균(pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| 혈청 | 30 | 0.31-3.78 | 100 | 1.11 |
혈청/혈장 – 겉보기에 건강한 지원자로부터 얻은 30개의 샘플을 통해 이 분석에서 CTLA-4의 존재 여부를 평가했습니다. 기증자에 대한 병력이 없습니다.
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