인간 CCL5/RANTES ELISA 키트
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제품 세부정보
배경
CCL5로도 알려져 있는 RANTES(활성화 시 조절, 정상 T 세포 발현 및 추정 분비)는 케모카인의 "CC" 서브패밀리의 구성원입니다. 이는 백혈구를 화학적으로 유인하고 그 기능을 조절하는 능력을 통해 염증성 면역 반응에서 주요 역할을 합니다. RANTES에 대한 cDNA는 처음에 T 세포 특이적 서열로서 감산 혼성화에 의해 발견되었습니다. 인간 RANTES cDNA는 절단되어 68개 아미노산 성숙 단백질을 생성하는 23개 아미노산 소수성 신호 펩타이드가 있는 고도로 염기성인 91개 아미노산(aa) 잔기 전구체 폴리펩티드를 암호화합니다. 인간 RANTES는 추론된 aa 수준에서 마우스 RANTES와 약 85%의 상동성을 나타냅니다.
RANTES는 자극되지 않은 CD4+/CD45RO+ 기억 T 세포와 순수 및 기억 표현형을 갖는 자극된 CD4+ 및 CD8+ T 세포, NK 세포, 호염기구, 호산구, 수지상 세포, 비만 세포, 단핵구 및 소교세포를 포함한 다양한 세포 유형에 대한 강력한 화학유인물질입니다. 이동에 대한 효과 외에도 RANTES는 T 세포, 단핵구, 호중구, NK 세포, 수지상 세포 및 성상교세포를 포함한 다양한 세포 유형을 활성화할 수 있습니다. T 세포 활성화는 일반적으로 상대적으로 높은 RANTES 농도(~1 μM)를 필요로 하며 분자의 응집 및 세포 표면 글리코사미노글리칸(GAG)과의 결합에 따라 달라집니다. 생쥐에서 GAG를 응집 및/또는 결합할 수 없는 복강내 주사된 RANTES 돌연변이가 야생형 대조군과 비교할 때 백혈구를 유인할 수 없지만 이것이[일부 단어 누락, 아마도 '생체 내에서 활동이 발생함'] 여부는 불분명합니다. 다른 생체 내 연구에 따르면 RANTES 녹아웃 마우스는 급성 염증 부위에 백혈구가 부족한 것으로 나타났습니다. - RANTES는 확인된 7개의 막횡단 G-단백질 결합 수용체 4개(CCR1, CCR3, CCR4 및 CCR5)와 상호작용하는 것으로 알려져 있습니다(22-25). RANTES 자극은 세포 상황에 따라 달라지는 다양한 신호 전달 계통을 시작할 수 있습니다. 예를 들어, T-세포에서 RANTES는 세포내 Ca2+의 상승과 국소 접착 키나제(FAK), 단백질 키나제 A, PI3-키나제, Rho GTPase 및 JAK/STAT 신호 전달 경로의 활성화를 자극할 수 있습니다. 거대세포바이러스 단백질 US28은 CC 케모카인 수용체와 상당한 상동성을 나타내며 RANTES에 결합할 수 있습니다. 막에 걸친 US28은 상황에 따라 구성적인 방식으로 신호를 보내고 RANTES에 결합하여 G-단백질 매개 신호 전달 계통을 시작하거나 RANTES를 격리하고 잠재적으로 염증 반응을 변경할 수 있습니다.
RANTES 수용체 CCR5는 HIV-1의 R5(M-tropic) 변종에 대한 주요 공동수용체이기도 합니다. RANTES는 다른 CCR5 리간드인 대식세포 염증성 단백질(MIP)-1 알파 및 MIP-1 베타뿐만 아니라 경쟁적으로 CCR5/HIV-1 상호작용을 억제하고 시험관 내에서 바이러스 감염을 억제할 수 있다는 것이 입증되었습니다. 이러한 효과는 분명히 CCR5 수용체의 완전한 신호 전달을 필요로 하지 않습니다. 결과적으로, HIV-1과 CCR5의 상호작용을 차단하는 변형된 형태의 RANTES 및 비펩티드 화합물은 미래 치료법에 대한 가능성을 보여줍니다. 대조적으로, 여러 보고서에 따르면 RANTES는 CCR5가 아닌 CXCR4를 보조 수용체로 사용하는 HIV-1의 X4(T-tropic) 변종의 시험관 내 복제를 향상시킬 수 있습니다. 이 활동은 일반적으로 상대적으로 높은 RANTES 농도(~μM)를 필요로 하며 세포 표면 GAG와의 상호작용, 올리고머화, 티로신 키나제 및 MAP 키나제 신호 전달 계통의 활성화에 따라 달라집니다.
RANTES는 자극되지 않은 CD4+/CD45RO+ 기억 T 세포와 순수 및 기억 표현형을 갖는 자극된 CD4+ 및 CD8+ T 세포, NK 세포, 호염기구, 호산구, 수지상 세포, 비만 세포, 단핵구 및 소교세포를 포함한 다양한 세포 유형에 대한 강력한 화학유인물질입니다. 이동에 대한 효과 외에도 RANTES는 T 세포, 단핵구, 호중구, NK 세포, 수지상 세포 및 성상교세포를 포함한 다양한 세포 유형을 활성화할 수 있습니다. T 세포 활성화는 일반적으로 상대적으로 높은 RANTES 농도(~1 μM)를 필요로 하며 분자의 응집 및 세포 표면 글리코사미노글리칸(GAG)과의 결합에 따라 달라집니다. 생쥐에서 GAG를 응집 및/또는 결합할 수 없는 복강내 주사된 RANTES 돌연변이가 야생형 대조군과 비교할 때 백혈구를 유인할 수 없지만 이것이[일부 단어 누락, 아마도 '생체 내에서 활동이 발생함'] 여부는 불분명합니다. 다른 생체 내 연구에 따르면 RANTES 녹아웃 마우스는 급성 염증 부위에 백혈구가 부족한 것으로 나타났습니다. - RANTES는 확인된 7개의 막횡단 G-단백질 결합 수용체 4개(CCR1, CCR3, CCR4 및 CCR5)와 상호작용하는 것으로 알려져 있습니다(22-25). RANTES 자극은 세포 상황에 따라 달라지는 다양한 신호 전달 계통을 시작할 수 있습니다. 예를 들어, T-세포에서 RANTES는 세포내 Ca2+의 상승과 국소 접착 키나제(FAK), 단백질 키나제 A, PI3-키나제, Rho GTPase 및 JAK/STAT 신호 전달 경로의 활성화를 자극할 수 있습니다. 거대세포바이러스 단백질 US28은 CC 케모카인 수용체와 상당한 상동성을 나타내며 RANTES에 결합할 수 있습니다. 막에 걸친 US28은 상황에 따라 구성적인 방식으로 신호를 보내고 RANTES에 결합하여 G-단백질 매개 신호 전달 계통을 시작하거나 RANTES를 격리하고 잠재적으로 염증 반응을 변경할 수 있습니다.
RANTES 수용체 CCR5는 HIV-1의 R5(M-tropic) 변종에 대한 주요 공동수용체이기도 합니다. RANTES는 다른 CCR5 리간드인 대식세포 염증성 단백질(MIP)-1 알파 및 MIP-1 베타뿐만 아니라 경쟁적으로 CCR5/HIV-1 상호작용을 억제하고 시험관 내에서 바이러스 감염을 억제할 수 있다는 것이 입증되었습니다. 이러한 효과는 분명히 CCR5 수용체의 완전한 신호 전달을 필요로 하지 않습니다. 결과적으로, HIV-1과 CCR5의 상호작용을 차단하는 변형된 형태의 RANTES 및 비펩티드 화합물은 미래 치료법에 대한 가능성을 보여줍니다. 대조적으로, 여러 보고서에 따르면 RANTES는 CCR5가 아닌 CXCR4를 보조 수용체로 사용하는 HIV-1의 X4(T-tropic) 변종의 시험관 내 복제를 향상시킬 수 있습니다. 이 활동은 일반적으로 상대적으로 높은 RANTES 농도(~μM)를 필요로 하며 세포 표면 GAG와의 상호작용, 올리고머화, 티로신 키나제 및 MAP 키나제 신호 전달 계통의 활성화에 따라 달라집니다.
일반적인 데이터
| pg/ml | 외경 | 평균 | 수정됨 | |
| 0.00 | 0.0151 | 0.0162 | 0.0157 | |
| 13.72 | 0.0271 | 0.0288 | 0.0280 | 0.0123 |
| 41.15 | 0.0489 | 0.0496 | 0.0493 | 0.0336 |
| 123.46 | 0.1175 | 0.1189 | 0.1182 | 0.1025 |
| 370.37 | 0.3486 | 0.3520 | 0.3503 | 0.3346 |
| 1111.11 | 1.0108 | 0.9250 | 0.9679 | 0.9522 |
| 3333.33 | 1.8759 | 2.0533 | 1.9646 | 1.9489 |
| 10000.00 | 3.2985 | 3.1585 | 3.2285 | 3.2128 |
정밀도
| 분석 내 정밀도 | 분석 간 정밀도 | |||||
| 샘플 번호 | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| 평균(pg/ml) | 426.6 | 1631.6 | 3396 | 702.2 | 3412 | 8842.1 |
| 표준편차 | 37.6 | 128.2 | 288.6 | 44.6 | 194.4 | 506.5 |
| 변동계수(%) | 8.8 | 7.9 | 8.5 | 6.4 | 5.7 | 5.7 |
분석 내 정밀도(분석 내 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 하나의 플레이트에서 20회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
분석 간 정밀도(분석 간 정밀도) 알려진 농도의 3개 샘플을 한 플레이트에서 6회 테스트하여 분석 내 정밀도를 평가했습니다.
스파이크 복구
스파이크 회복은 3가지 수준의 인간 CCL5를 건강한 인간 혈청 샘플에 스파이킹하여 평가했습니다. 본 실험에서는 스파이킹되지 않은 혈청을 블랭크로 사용하였다.
회수율은 90%~106%였으며 전체 평균 회수율은 97%였습니다.
회수율은 90%~106%였으며 전체 평균 회수율은 97%였습니다.
샘플 값
| 샘플 매트릭스 | 샘플 평가됨 | 범위(pg/ml) | 감지 가능(%) | 검출 평균(pg/ml) |
| 혈청 | 30 | 943.0-38560.8 | 100 | 21207.7 |
혈청/혈장 – 겉보기에 건강한 지원자로부터 얻은 30개의 샘플을 통해 이 분석에서 CCL5의 존재 여부를 평가했습니다. 기증자에 대한 병력이 없습니다.
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