Kit ELISA IL-8/CXCL8 Manusia

Interleukin-8 (IL-8), juga dikenal sebagai IL-8, GCP-1, dan NAP-1, adalah anggota kemokin alfa, atau keluarga kemokin alfa, yang mengikat heparin-8-9 kDa. Setidaknya ada 15 manusia anggota keluarga CXC yang semuanya mengadopsi struktur tiga beta -sheet/satu alpha -helix. Kebanyakan kemokin CXC menunjukkan motif tripeptida N-terminal Glu-Leu-Arg (ELR). IL-8 bersirkulasi sebagai monomer, homodimer, dan heterodimer dengan CXCL4/PF4. Monomer dianggap paling bio-aktif, sedangkan heterodimer dapat mempotensiasi aktivitas PF4. Oligomerisasi IL-8 dimodulasi oleh interaksinya dengan matriks dan glikosaminoglikan permukaan sel (GAGs). IL-8 manusia dewasa memiliki 65-69% identitas asam amino (aa) yang sama dengan IL-8 anjing, kucing, dan babi. Tidak ada pasangan gen IL-8 pada hewan pengerat. - Berbagai isoform IL-8 dihasilkan melalui penyambungan alternatif dan pembelahan proteolitik diferensial. Pada manusia, penyambungan alternatif menghasilkan iso-form dengan sebelas substitusi aa di terminal C-. Pemrosesan proteolitik menghasilkan pemotongan IL-8 di terminal N-dan kemungkinan merupakan peristiwa spesifik sel. Misalnya, fibroblas dan sel endotel menghasilkan bentuk 1-77 dengan membelah IL-8 mengikuti Glu21, sedangkan monosit dan limfosit menghasilkan bentuk 6-77 dengan membelah mengikuti Leu25. Bentuk terpotong ini umumnya menunjukkan peningkatan bioaktivitas, terutama melalui reseptor CXCR1. IL-8 juga dapat mengalami sitrullinasi pada Arg27 dari prekursornya, suatu modifikasi yang meningkatkan waktu paruh dan kemampuannya untuk menginduksi leukositosis. Berbagai macam sel mensekresi IL-8 termasuk monosit dan neutrofil, fibroblas dan keratinosit, sel mast, sel otot polos visceral, sel dendritik, sel alveolar besar tipe II, dan sel endotel. - Bioaktivitas IL-8 dimediasi melalui dua reseptor berpasangan G-protein-, yang disebut CXCR1/IL-8 RA dan CXCR2/IL-8 RB. CXCR1 berukuran 45-50 kDa dan digunakan hampir secara eksklusif oleh IL-8. CXCR2 berukuran 35-40 kDa dan digunakan oleh hampir semua kemokin CXC. Baik CXCR1 dan CXCR2 secara konstitutif berasosiasi menjadi homodimer fungsional. Mereka juga dapat melakukan heterodimerisasi, tetapi kompleks ini berdisosiasi setelah pengikatan IL-8. CXCR2 merespons konsentrasi IL-8 yang rendah dan terutama terkait dengan kemotaksis dan pelepasan MMP-9. CXCR1, sebaliknya, merespons konsentrasi IL-8 yang tinggi dan berhubungan dengan ledakan pernapasan dan aktivasi fosfolipase D2. Dengan demikian, ligasi CXCR2 menginduksi adhesi leukosit ke endotel vaskular yang teraktivasi dan migrasi ke tempat peradangan, sementara ligasi CXCR1 meningkatkan aktivitas antimikroba neutrofil. IL-8 juga dapat membentuk kompleks dengan Serpin A1/alpha-1 Antitrypsin, dan ini mencegah interaksi IL-8 dengan CXCR1. - Selain efek pro-inflamasinya, IL-8 terlibat dalam angiogenesis dan patogenesis aterosklerosis dan kanker. Ini menginduksi ekspresi VEGF dalam sel endotel vaskular dan berfungsi sebagai faktor autokrin untuk pertumbuhan EC dan angiogenesis. Hal ini diregulasi pada lesi aterosklerotik dan meningkat dalam serum dan cairan serebrospinal setelah infark miokard. Pada kanker, IL-8 mendorong transisi epitel-mesenkim serta invasi dan metastasis sel tumor.

hal/ml	OD.		Rata-rata	Dikoreksi
0.00	0.0381	0.0373	0.0377
4.12	0.0493	0.0533	0.0513	0.0136
12.35	0.0743	0.0785	0.0764	0.0387
37.04	0.1583	0.1604	0.1594	0.1217
111.11	0.3773	0.3767	0.377	0.3393
333.33	0.9294	0.9447	0.9371	0.8994
1000.00	2.3256	2.3424	2.3340	2.2963
3000.00	4.0171	4.1382	4.0777	4.0400

	Presisi Intra - pengujian			Presisi Antar-pengujian
Nomor Sampel	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Rata-rata (pg/ml)	54.3	279.3	896.1	51.2	259.7	780.4
Deviasi Standar	1.9	8.3	31.3	3.4	14.2	25.7
Koefisien Variasi (%)	3.4	3	3.5	6.7	5.5	3.3

Presisi Intra-assay (Presisi dalam suatu pengujian) Tiga sampel dengan konsentrasi yang diketahui diuji dua puluh kali pada satu pelat untuk menilai presisi intra-assay.

Presisi Antar-pengujian (Presisi antar pengujian) Tiga sampel dengan konsentrasi yang diketahui diuji enam kali pada satu pelat untuk menilai presisi intra-pengujian.

Pemulihan lonjakan dievaluasi dengan memasukkan 3 level IL-8 manusia ke dalam sampel serum manusia yang sehat. Serum yang tidak diberi duri digunakan sebagai blanko dalam percobaan ini.
Pemulihan berkisar antara 84% hingga 117% dengan rata-rata pemulihan keseluruhan sebesar 102%.

Contoh Matriks	Sampel Dievaluasi	Kisaran (hal/ml)	Terdeteksi (%)	Rata-rata Terdeteksi (pg/ml)
serum	30	43.4-359.3	100	127.2

Serum/Plasma – Tiga puluh sampel dari sukarelawan yang tampak sehat dievaluasi keberadaan IL-8 dalam pengujian ini. Tidak ada riwayat medis yang tersedia untuk para donor.