Monoklonaler Kaninchen-Antikörper Topoisomerase 1 (C3201)

Sicherheitsdatenblatt

Topoisomerase 1 Rabbit Monoclonal Antibody(C3201)

Hauptmerkmale und Details

Monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Topoisomerase 1

Ziel: Topoisomerase 1
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte
Klonalität: Monoklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : AMA02813

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Löst die Superspiral- und Torsionsspannung der DNA, die während der DNA-Replikation und -Transkription entsteht, indem ein Strang des DNA-Duplex vorübergehend gespalten und wieder verbunden wird. Führt einen Einzelstrangbruch durch Umesterung an einer Zielstelle in der Duplex-DNA ein. Der spaltbare Phosphodiester wird durch das katalytische Tyrosin des Enzyms angegriffen, was zur Bildung eines DNA-(3'-Phosphotyrosyl)-Enzym-Zwischenprodukts und der Ausstoßung eines 5'-OH-DNA-Strangs führt. Der freie DNA-Strang rotiert dann um die intakte Phosphodiesterbindung am Gegenstrang und entfernt so DNA-Supercoils. Schließlich greift im Religationsschritt die 5'-OH-Position der DNA das kovalente Zwischenprodukt an, um das Tyrosin im aktiven Zentrum auszutreiben und das DNA-Phosphodiester-Rückgrat wiederherzustellen.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
IF/ICC	1:50 - 1:100

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Topoisomerase 1
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an Topoisomerase-1-Protein.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	Ein synthetisches Peptid der menschlichen Topoisomerase I
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 91 kD; Beobachtet: 91 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit in 50 mM Tris-Glycin (pH 7,4), 0,15 M NaCl, 50 % Glycerin, 0,01 % Natriumazid und 0,05 % BSA.
Alternative Namen	DNA-Topoisomerase 1; DNA-Topoisomerase I
Gensymbol	TOP1
Entrez Gene	7150 (Mensch); 21969(Maus); 64550(Ratte)
SwissProt	P11387 (Mensch); Q04750(Maus); Q9WUL0(Ratte)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der Topoisomerase-1-Expression in Ganzzelllysaten von K562 (A), Rattenhirn (B), C6 (C), NIH3T3 (D) und Hela (E). (Vorhergesagte Bandengröße: 91 kD; beobachtete Bandengröße: 91 kD)

Immunhistochemische Analyse der Topoisomerase-1-Färbung in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten bei menschlichem Dickdarmkrebs. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der Topoisomerase-1-Färbung in HeLa-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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