Tau (S305) monoklonaler Maus-Antikörper (ARA971)

Western-Blot-Analyse von Tau (S305) durch ARA6837.
Verschiedene Proteinproben wurden auf 6-18 % SDS-PAGE unter reduzierenden Bedingungen laufen gelassen und auf eine Nitrozellulosemembran geblottet. Als primärer Antikörper wurde ARA6837 und als sekundärer Antikörper Peroxidase-konjugiertes Ziegen-Anti-Maus-IgG verwendet. Die Tau-Bande wurde mit ECL Western Blotting Substrate sichtbar gemacht.
Spur 1: 15 μg Hirngewebelysat
Spur 2: 15 μg Rattenhirngewebe-Lysat
Spur 3: 15 μg Maushirngewebe2-Lysat
Ergebnis: ARA6837 kann Tau durch Western Blot erkennen.

IHC-P wurde unter Verwendung von Schnitten formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Hirngewebes durchgeführt. Das Antigen wurde durch Zugabe von kochendem Tris/EDTA-Puffer, pH 9, in einem Schnellkochtopf für 3 Minuten gewonnen. Die endogene Peroxidaseaktivität wurde durch 30-minütige Inkubation der Schnitte mit 3 % H₂O₂ bei Raumtemperatur gelöscht. Die Schnitte wurden dann 1 Stunde lang bei Raumtemperatur mit Primärantikörper (ARA6837) inkubiert. Als Sekundärantikörper wurde Polyperoxidase-konjugiertes Ziegen-Anti-Maus-IgG verwendet. Als Chromogen wurde Diaminobenzidin verwendet. Der Schnitt wurde mit Hämatoxylin gegengefärbt. Als Hintergrundkontrolle wurde ein mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung inkubierter Gewebeschnitt und anschließende Inkubation mit dem sekundären Antikörper verwendet.
Ergebnis: Neuropil ist positiv gefärbt.


Sandwich-ELISA-Analyse von Tau (S305) durch ARA6837 und ARA6844.
Mikrotiterplatten wurden mit ARA6844 als Fängerantikörper beschichtet. Als Antigen wurde rekombinantes pTau181-Protein (Kat. AXP6613) verwendet. Peroxidase-konjugierter pTau181-Antikörper (ARA6837) diente als Nachweisantikörper.
Ergebnis: ARA6837 und ARA6844 können als passendes Antikörperpaar zum Nachweis und zur Quantifizierung der Konzentration von pTau181 verwendet werden.

Sandwich-ELISA-Analyse von Tau (S305) durch ARA6837 und ARA6848.
Mikrotiterplatten wurden mit ARA6848 als Fängerantikörper beschichtet. Als Antigen wurde rekombinantes pTau205-Protein (Kat. AXP6615) verwendet. Biotin-konjugierter pTau205-Antikörper (ARA6837) diente als Nachweisantikörper, gefolgt von Streptavidin-HRP-Inkubation.
Ergebnis: ARA6837 und ARA6848 können als passendes Antikörperpaar zum Nachweis und zur Quantifizierung der Konzentration von pTau205 verwendet werden.

Kreuzreaktivität von ARA6837 mit anderen Peptiden und rekombinanten Proteinen durch ELISA. Mikrotitervertiefungen wurden mit verschiedenen Peptiden und rekombinanten Proteinen beschichtet.
Als primärer Antikörper wurde ARA6837 und als sekundärer Antikörper Peroxidase-konjugiertes Ziegen-Anti-Maus-IgG verwendet.
Ergebnis: ARA6837 kann Tau-Proteine ​​unabhängig von der Phosphorylierung erkennen.

Immunfluoreszenzanalyse von Tau (S305) durch ARA6837. Immunfluoreszenzanalyse primärer Rattenneuronen durch Tau (S305)-Antikörper (ARA6837). Die Zellen wurden fixiert, permeabilisiert, blockiert und mit dem Primärantikörper (1:250) inkubiert. Nach der sekundären Antikörperfärbung wurden die Zellkerne gegengefärbt.


Epitopanalyse von Tau (S305) durch ARA6837 mittels ELISA.
Synthetische Peptide, die die angegebenen Rückstände enthielten, wurden auf Mikrotitervertiefungen aufgetragen. Rekombinante Tau- (2-244), Tau- (1-368), Tau- (243-368) und Tau- (1-441) Proteine ​​mit Isoform P10636-8 oder Tau (1-758) mit Isoform P10636-1 wurden ebenfalls beschichtet. Als Primärantikörper wurde der Antikörper ARA6837 eingesetzt. Als Sekundärantikörper wurde Peroxidase-konjugiertes Ziegen-Anti-Maus-IgG verwendet und die Signale wurden mithilfe eines kolorimetrischen Assays nachgewiesen.
Ergebnis: ARA6837 erkennt Tau-Protein, das S305- und S356-Peptide enthält, die eine Sequenz von HVPGGG teilen.