Ratten-IL-6-ELISA-Kit

Interleukin 6 (IL-6) ist ein pleiotropes, a-helicales, 22-28 kDa phosphoryliertes und variabel glykosyliertes Zytokin, das eine wichtige Rolle bei der Akute-Phase-Reaktion, Entzündung, Hämatopoese, dem Knochenstoffwechsel und dem Fortschreiten des Krebses spielt. Reifes menschliches IL-6 hat eine Länge von 183 Aminosäuren (aa) und weist eine Sequenzidentität von 39 % mit Maus- und Ratten-IL-6 auf. Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen mit internen Deletionen, von denen einige antagonistische Eigenschaften aufweisen. Zu den Zellen, von denen bekannt ist, dass sie IL-6 exprimieren, gehören CD8+-T-Zellen, Fibroblasten, Synoviozyten, Adipozyten, Osteoblasten, Megakaryozyten, Endothelzellen (unter dem Einfluss von Endothelinen), sympathische Neuronen, Neuronen der Großhirnrinde, chromaffine Zellen des Nebennierenmarks, retinale Pigmentzellen, Mastzellen, Keratinozyten, Langerhans-Zellen, fetale und erwachsene Zellen Astrozyten, Neutrophile, Monozyten, Eosinophile, Epithelzellen des Dickdarms, B1-B-Zellen und Betazellen der Pankreasinseln. Die IL-6-Produktion hängt im Allgemeinen mit der Zellaktivierung zusammen und wird normalerweise durch Glukokortikoide, Katecholamine und sekundäre Sexualsteroide unter Kontrolle gehalten. Der normale IL-6-Wert im menschlichen Blutkreislauf liegt im Bereich von 1 pg/ml, mit leichten Erhöhungen während des Menstruationszyklus, mäßigen Erhöhungen bei bestimmten Krebsarten und starken Erhöhungen nach Operationen.
IL-6 induziert die Signalübertragung über einen heterodimeren Rezeptorkomplex auf der Zelloberfläche, der aus einer Ligandenbindungsuntereinheit (IL-6 R alpha) und einer signaltransduzierenden Untereinheit (gp130) besteht. IL-6 bindet an IL-6 Ra und löst die IL-6 Ra-Assoziation mit gp130 und die gp130-Dimerisierung aus. gp130 ist auch Bestandteil der Rezeptoren für CLC, CNTF, CT-1, IL-11, IL-27, LIF und OSM. Lösliche Formen von IL-6 Ra werden sowohl durch alternatives Spleißen als auch durch proteolytische Spaltung erzeugt. In einem Mechanismus, der als Trans-Signalisierung bekannt ist, lösen Komplexe aus löslichem IL-6 und IL-6 Ra Reaktionen von gp130-exprimierenden Zellen aus, denen IL-6 Ra auf der Zelloberfläche fehlt. Trans-signing ermöglicht es einem breiteren Spektrum von Zelltypen, auf IL-6 zu reagieren, da die Expression von gp130 allgegenwärtig ist, während die von IL-6 Ra überwiegend auf Hepatozyten, Monozyten und ruhende Lymphozyten beschränkt ist. Lösliche Spleißformen von gp130 blockieren die Signalübertragung von IL-6/IL-6 Ra, nicht jedoch von anderen Zytokinen, die gp130 als Co-Rezeptor verwenden.
IL-6 steuert zusammen mit TNF-a und IL-1 die akute Entzündungsreaktion. IL-6 ist fast ausschließlich für Fieber und die Akute-Phase-Reaktion in der Leber verantwortlich und ist wichtig beim Übergang von einer akuten Entzündung zu einer erworbenen Immunität oder einer chronischen Entzündungserkrankung. Wenn es fehlreguliert ist, trägt es zu chronischen Entzündungen bei Erkrankungen wie Fettleibigkeit, Insulinresistenz, entzündlichen Darmerkrankungen, Arthritis und Sepsis bei.
IL-6 moduliert die Knochenresorption und ist durch seine Förderung der Entwicklung und Aktivität von Th17-Zellen ein wichtiger Auslöser der entzündlichen Gelenkzerstörung bei rheumatoider Arthritis. Es trägt zur Entwicklung und Destabilisierung von atherosklerotischen Plaques sowie zur Entwicklung einer mit Entzündungen verbundenen Karzinogenese bei.

pg/ml	Außendurchmesser		Durchschnittlich	Korrigiert
0.00	0.0579	0.0616	0.0598
13.72	0.0653	0.0578	0.0616	0.0018
41.15	0.0688	0.0633	0.0661	0.0063
123.46	0.0853	0.0851	0.0852	0.0255
370.37	0.2024	0.2009	0.2017	0.1419
1111.11	0.5716	0.5064	0.5390	0.4793
3333.33	2.1332	2.1088	2.1210	2.0613
10000.00	4.5694	4.4840	4.5267	4.4670

	Intra-Assay-Präzision			Präzision zwischen Assays
Probennummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Durchschnitt (pg/ml)	126.5	792.2	2890.8	155.2	987.5	3062.8
Standardabweichung	7.8	63.2	242	7.3	39.5	87.8
Variationskoeffizient (%)	6.2	8.0	8.4	4.7	4.0	2.9

Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Ratten-IL-6-Konzentrationen zu einer gesunden Rattenserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesen Experimenten als Blindwert verwendet.

Die Wiederherstellung lag zwischen 71 % und 99 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 89 %.

Beispielmatrix	Probe ausgewertet	Bereich (pg/ml)	Nachweisbar (%)	Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml)
Serum	30	n.d.	0	0

Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Ratten wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von IL-6 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.

n.d. = nicht-nachweisbar. Proben, die unterhalb der Empfindlichkeit liegen, gelten als nicht nachweisbar.