Ratten-IL-2-ELISA-Kit

Interleukin 2 (IL-2), auch bekannt als T-Zell-Wachstumsfaktor (TCGF), ist ein 15-18 kDa großes, variabel glykosyliertes Alpha-Helix-Polypeptid, das zur Familie der Common Gamma Chain (Gamma C)-Zytokine gehört. Es liegt als Monomer vor und hat eine besonders kurze Halbwertszeit (< 30 Minuten). Humanes IL-2 wird als Vorläufer aus 153 Aminosäuren (aa) synthetisiert, der eine Signalsequenz von 20 aa und eine reife Region von 133 aa enthält. Die reife Region ist von Natur aus alpha-helikal und enthält eine genutzte O-verknüpfte Glykosylierungsstelle an Thr3 sowie drei Cysteine, von denen zwei eine Disulfidbindung innerhalb der Kette bilden, die für die Aktivität wesentlich ist. Reifes menschliches IL-2 weist eine Identität von 73 %, 66 %, 78 % bzw. 97 % mit IL-2 von Hunden, Ratten, Katzen und Rhesusaffen auf. Obwohl menschliches IL-2 nur etwa 60 % der Aminosäureidentität mit dem hochpolymorphen Maus-IL-2 teilt, ist bekannt, dass menschliches IL-2 auf auf Maus-IL-2 reagierenden Zellen aktiv ist. Zu den Zellen, von denen berichtet wird, dass sie IL-2 sezernieren, gehören Gamma-δ-T-Zellen, aktivierte konventionelle CD4+- und CD8+-T-Zellen, Neuronen, Mikroglia und hämatopoetische Stammzellen.
Der Rezeptor für IL-2 (IL-2 R) besteht aus drei Untereinheiten, der 55 kDa CD25/IL-2 R Alpha-Kette, der 70 kDa IL-2 R Beta-Kette und der 65 kDa Common Gamma Chain. IL-2 bindet zunächst an CD25, der binäre Komplex rekrutiert dann IL-2 R beta und gamma c, um den quartären Signalkomplex zu bilden. Zusätzlich zu IL-2 wird IL-2 R beta von IL-15 in seinem quartären Signalkomplex verwendet. Gamma C dient auch als Signalrezeptor für IL-4, -7, -9, -15 und -21.
In-vitro-Studien haben gezeigt, dass IL-2 eine wichtige Rolle bei der Aktivierung und Expansion von T-Zellen spielt. In vivo ist IL-2 entscheidend für die Entwicklung, Aufrechterhaltung und Funktion regulatorischer T-Zellen (Treg), die Schutz vor Autoimmunerkrankungen bieten. Andererseits kann IL-2 durch seine Rolle bei der Regulierung der Expression von Genen für den T-Zell-Handel und der Produktion von Th2-Zytokinen auch Autoimmunentzündungen in Zielorganen fördern. Innerhalb der CD8+-T-Zell-Untergruppe ist IL-2 für optimale Primärreaktionen und die Differenzierung in terminale Effektorzellen unerlässlich. IL-2 fördert auch die Entwicklung aktivierter CD8+ T-Zellen zu Gedächtniszellen.

pg/ml	Außendurchmesser		Durchschnittlich	Korrigiert
0.00	0.0645	0.0636	0.0641
10.97	0.0731	0.0733	0.0732	0.0092
32.92	0.0872	0.0873	0.0873	0.0232
98.77	0.1382	0.1433	0.1408	0.0767
296.30	0.2812	0.2953	0.2883	0.2242
888.89	0.6422	0.6543	0.6483	0.5842
2666.67	1.5432	1.5153	1.5293	1.4652
8000.00	3.0881	3.1932	3.1407	3.0766

	Intra-Assay-Präzision			Präzision zwischen Assays
Probennummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Durchschnitt (pg/ml)	139	708.7	2461.3	141.5	712.2	2421.2
Standardabweichung	7.5	21.9	120.7	9.3	34.2	130.7
Variationskoeffizient (%)	5.4	3.1	4.9	6.6	4.8	5.4

Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Ratten-IL-2-Konzentrationen zu einer gesunden Rattenserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesen Experimenten als Blindwert verwendet.

Die Wiederherstellung lag zwischen 83 % und 110 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 95 %.

Beispielmatrix	Probe ausgewertet	Bereich (pg/ml)	Nachweisbar (%)	Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml)
Serum	30	9,9-387,7	50	92.4

Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Ratten wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von IL-6 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.

n.d. = nicht-nachweisbar. Proben, die unterhalb der Empfindlichkeit liegen, gelten als nicht nachweisbar.