NEDD8 monoklonaler Maus-Antikörper (C2868)

Sicherheitsdatenblatt

Hauptmerkmale und Details

Maus monoklonal nach NEDD8

Ziel: NEDD8
Quelle/Host: Maus
Reaktivität: Menschlich
Klonalität: Monoklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC, FC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : AMA02480

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Ubiquitin-ähnliches Protein, das durch seine Konjugation an eine begrenzte Anzahl zellulärer Proteine, wie etwa Culline oder p53/TP53, eine wichtige Rolle bei der Kontrolle des Zellzyklus und der Embryogenese spielt. Die Bindung von NEDD8 an Culline ist entscheidend für die Rekrutierung von E2 in den auf Cullin-RING- basierenden E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplex und erleichtert so die Polyubiquitinierung und den proteasomalen Abbau von Cyclinen und anderen regulatorischen Proteinen. Die Bindung von NEDD8 an p53/TP53 hemmt die Transkriptionsaktivität von p53/TP53. Die kovalente Bindung an seine Substrate erfordert eine vorherige Aktivierung durch den E1-Komplex UBE1C-APPBP1 und eine Verknüpfung mit dem E2-Enzym UBE2M.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:500
IF/ICC	1:100 - 1:500
FC	1:100 - 1:200

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Maus monoklonal nach NEDD8
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an NEDD8-Protein
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	Rekombinantes Fusionsprotein von menschlichem NEDD8, exprimiert in E. Coli
Reinigung	Dieser Antikörper wird über eine Protein-G-Säule gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 9 kD; Beobachtet: 85 kD kD
Form/Puffer	Maus-IgG1. Flüssigkeit in PBS, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	NEDD8; Neddylin; Neurale Vorläuferzelle exprimierte entwicklungsbedingt herunterreguliertes Protein 8; NEDD-8; Ubiquitin-ähnliches Protein Nedd8
Gensymbol	NEDD8
Entrez Gene	4738 (Mensch)
SwissProt	Q15843 (Mensch)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der NEDD8-Expression in C6- (A) und Hela-Ganzzelllysaten (B). (Vorhergesagte Bandengröße: 9 kD; beobachtete Bandengröße: 85 kD kD)

Immunhistochemische Analyse der NEDD8-Färbung in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten von menschlichem Prostatakrebs. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der NEDD8-Färbung in Hela-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert. Phalloidin - AREX® Fluor 594 wurde zum Färben von Aktinfilamenten (rot) verwendet. Zur Färbung der Zellkerne (blau) wurde DAPI verwendet.

Durchflusszytometrische Analyse von HeLa-Zellen mit Anti-NEDD8-Antikörper (grün) und Negativkontrolle (rot).

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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