Maus-LIF-ELISA-Kit

Hauptmerkmale und Details

Spezifikation: 96 Test
Empfindlichkeit: 2,77 pg/ml (10 μl)
Standardkurvenbereich: 6,86~5000 pg/ml
Standardkurvensteigung: 7 Punkte/3 Falten
Anzahl der Inkubationen: 2
Probenvolumen: 10 μl
Testtyp: Sandwich Elisa
Betriebsdauer: 120min

Marke:

KAT.-NR. : AEM0038

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Größe:

96T

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Produktdetails

Hintergrund

Rekombinanter Maus-LIF (Leukämie-Hemmfaktor) wird häufig in Zellkulturen verwendet, um die Pluripotenz von Stammzellen aufrechtzuerhalten. LIF ist ein weit verbreitetes pleiotropes Mitglied der IL-6-Zytokinfamilie. Reifes Maus-LIF wird als stark und variabel glykosyliertes 32-62 kDa-Monomer exprimiert, das 78 %, 91 %, 80 %, 76 % bzw. 78 % Aminosäuresequenzidentität mit LIF von Mensch, Ratte, Hund, Rind bzw. Schwein aufweist. LIF funktioniert über einen heterodimeren Rezeptorkomplex, der eine ligandenbindende Untereinheit, LIF R alpha /CD118, und eine signaltransduzierende Untereinheit, gp130, enthält. gp130 dient auch als Untereinheit der Rezeptorkomplexe für Oncostatin M, Cardiotrophin-1, CNTF, IL-6, IL-11 und IL-27. Eine lösliche Form von Maus-LIF R alpha kann durch alternatives Spleißen erzeugt werden. Abhängig von den Zellen und ihrem Kontext wirkt LIF der Differenzierung entweder entgegen oder begünstigt sie. Vom Uterusendometrium produziertes LIF unterstützt die erfolgreiche Implantation des Embryos, fördert die Proliferation und Aufrechterhaltung der Pluripotenz in embryonalen Stammzellen und begünstigt die Proliferation von Vorläuferzelltypen wie hämatopoetischen Stammzellen. Überschüssiges LIF blockiert jedoch die Differenzierung embryoider Körper, was auf die Bedeutung der LIF-Regulierung hinweist. LIF wird von aktivierten CD4+-T-Zellen produziert und wird vom Thymusepithel zur Unterstützung der T-Zell-Reifung benötigt. Seine Expression wird durch eine neuronale Schädigung hochreguliert und es fördert das Überleben von Motoneuronen und die Myelinisierung von Oligodendrozyten. Es wird von der Nebennierenrinde produziert und steigert wahrscheinlich die Nebennierenproduktion von Cortisol und Aldosteron. LIF kann bei einigen Bauchspeicheldrüsenkrebsarten auch als autokriner Wachstumsfaktor fungieren, induziert jedoch die Differenzierung in der myeloischen Leukämiezelllinie M1. Von Tumorzellen abgeleitetes LIF kann auch die Bildung immunsuppressiver tumorassoziierter Makrophagen induzieren. LIF fördert den Umbau des Endometriums und die Differenzierung von Adipozyten und glatten Herzmuskelzellen. Es fördert die Regulierung von T-Zellen und hemmt die Differenzierung von Th17-Zellen, wodurch Entzündungen herunterreguliert werden und die Immuntoleranz während der Schwangerschaft und im Nervensystem gefördert wird.

Typische Daten

pg/ml	Außendurchmesser		Durchschnittlich	Korrigiert
0.00	0.0337	0.0309	0.0323
6.86	0.0458	0.0440	0.0449	0.0126
20.58	0.0698	0.0664	0.0681	0.0358
61.73	0.1404	0.1345	0.1375	0.1052
185.19	0.3507	0.3391	0.3449	0.3126
555.56	0.9113	0.9009	0.9061	0.8738
1666.67	2.1080	2.0780	2.0930	2.0607
5000.00	3.6630	3.7060	3.6845	3.6522

Präzision

	Intra-Assay-Präzision			Präzision zwischen Assays
Probennummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
Probennummer	22	22	22	6	6	6
Durchschnitt (pg/ml)	102.3	501.8	1489.4	100.7	491.3	1511.1
Standardabweichung	3.2	20.1	62.0	3.6	15.2	44.2
Variationskoeffizient (%)	3.1	4.0	4.2	3.5	3.1	2.9

Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Spike-Wiederherstellung

Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von Maus-LIF in eine gesunde Mausserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.
Die Wiederherstellung lag zwischen 94 % und 105 %, wobei die durchschnittliche Gesamtwiederherstellung 100 % betrug.

Beispielwerte

Beispielmatrix	Probe ausgewertet	Bereich (pg/ml)	Nachweisbar (%)	Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml)
Serum	30	133,17-389,78	100	261.5

Serum/Plasma – In diesem Test wurden 30 Proben von scheinbar gesunden Mäusen ausgewertet. Krankengeschichten der Spender waren nicht verfügbar.

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