Maus IL-2 ELISA Kit

Interleukin 2 (IL-2), auch bekannt als T-Zell-Wachstumsfaktor (TCGF), ist ein 15-18 kDa großes, variabel glykosyliertes Alpha-Helix-Polypeptid, das zur Familie der Common Gamma Chain (Gamma C)-Zytokine gehört. Es liegt als Monomer vor und hat eine besonders kurze Halbwertszeit (< 30 minutes). Human IL-2 is synthesized as a 153 amino acid (aa) precursor that contains a 20 aa signal sequence plus a 133 aa mature region. The mature region is alpha -helical in nature, and contains one utilized O-linked glycosylation site at Thr3 plus three cysteines, two of which form an intrachain disulfide bond that is essential for activity. Mature human IL-2 shares 73%, 66%, 78% and 97% aa identity with canine, rat, feline and rhesus monkey IL-2, respectively. Although human IL-2 shares only approximately 60% aa identity with the highly polymorphic mouse IL-2, human IL-2 is known to be active on mouse IL-2 responsive cells. Cells reported to secrete IL-2 include gamma δ T cells, activated conventional CD4+ and CD8+ T cells, neurons, microglia, and hematopoietic stem cells. The receptor for IL-2 (IL-2 R) is composed of three subunits, the 55 kDa CD25/IL-2 R alpha chain, the 70 kDa IL-2 R beta chain, and the 65 kDa Common gamma Chain. IL-2 first binds to CD25, the binary complex then recruits IL-2 R beta and gamma c to form the quaternary signaling complex. In addition to IL-2, IL-2 R beta is used by IL-15 in its quaternary signaling complex. gamma c also serves as a signaling receptor for IL-4, -7, -9, -15, and -21. In vitro studies have shown an important role for IL-2 in T cell activation and expansion. In vivo, IL-2 is critical for the development, maintenance and function of regulatory T cells (Treg) which provide protection against autoimmune disease. On the other hand, IL-2 can also promote autoimmune inflammation in target organs through its roles in regulating the expression of T cell trafficking genes, and production of Th2 cytokines. Within the CD8+ T cell subset, IL-2 is essential for optimal primary responses and differentiation into terminal effector cells. IL-2 also promotes the development of activated CD8+ T cells into memory cells.

pg/ml	Außendurchmesser		Durchschnittlich	Korrigiert
0.00	0.0100	0.0090	0.0095
2.74	0.0182	0.0182	0.0182	0.0087
8.23	0.0310	0.0310	0.0310	0.0215
24.69	0.0720	0.0736	0.0728	0.0633
74.07	0.1837	0.1918	0.1878	0.1783
222.22	0.5283	0.5149	0.5216	0.5121
666.67	1.4151	1.4413	1.4282	1.4187
2000.00	3.4657	3.4090	3.4374	3.4279

	Intra-Assay-Präzision			Präzision zwischen Assays
Probennummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Durchschnitt (pg/ml)	43.5	121.4	362	18.9	152.5	341.9
Standardabweichung	2.2	6.0	19.4	0.4	2.8	12.5
Variationskoeffizient (%)	5.1	5.0	5.4	2.1	1.8	3.6

Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von Maus-IL-2 in eine gesunde Mausserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.
Die Wiederherstellung lag zwischen 81 % und 108 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 94 %.

Beispielmatrix	Probe ausgewertet	Bereich (pg/ml)	Nachweisbar (%)	Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml)
Serum	30	n.d.-0,67	21	0.23

Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Mäusen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von IL-2 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.

n.d. = nicht-nachweisbar. Proben, die unterhalb der Empfindlichkeit liegen, gelten als nicht nachweisbar.