Maus-Granzyme-B-ELISA-Kit
Protokollbroschüre
Hauptmerkmale und Details
- Spezifikation:
- Empfindlichkeit:
- Standardkurvenbereich:
- Standardkurvensteigung:
- Anzahl der Inkubationen:
- Probenvolumen:
- Testtyp:
- Betriebsdauer:
-
Marke:
KAT.-NR. : AEM0016
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Größe:
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Produktdetails
Hintergrund
Granzym B ist ein Mitglied der Granzym-Familie der Serinproteasen, die speziell in Granula zytotoxischer T-Lymphozyten (CTL) und natürlicher Killerzellen (NK) vorkommen. Granzym B spielt eine wesentliche Rolle bei der granulatvermittelten Apoptose unter Verwendung der Substrate in diesem Ansatz, wie Caspase 3, Caspase 8 und Bid. Jüngste Forschungsergebnisse deuten darauf hin, dass die Funktionalität von Granzyme B neben seiner klassischen proapoptotischen Funktion auch extrazelluläre Rollen umfasst. Es wurde festgestellt, dass Granzym B ein wichtiger Vermittler von Hautverletzungen, -reparaturen und -entzündungen durch extrazelluläre Substrate wie Laminin, VE-Cadherin, Fibronektin und die Proteoglykane Aggrecan und Decorin ist. - Als eines der fünf im menschlichen Genom identifizierten Granzyme (A, B, H, K und M) ist Granzym B (32 kDa) hinsichtlich seiner biologischen Funktion und seines Nutzens für Gesundheit und Krankheit am umfassendsten erforscht. Es wird als Vorläufer (247 Reste) mit einem Signalpeptid (Reste 1-18), einem Propeptid (Reste 19-20) und einer reifen Kette (Reste 21-247) synthetisiert. Sobald Granzyme B sich im Granulat befindet, wird es vollständig zur reifen Kette verarbeitet und wird zu einer deaktivierten Protease, wenn das Propeptid Gly-Glu durch Spaltung mit Cathepsin C vom N-Terminus entfernt wird. Die Proteaseaktivität von Granzyme B wird durch Serpin B9/Proteaseinhibitor 9 streng kontrolliert. Die Aminosäuresequenz von menschlichem Granzyme B ist zu 71 %, 69 % und 68 % identisch mit der seines Hundes. Ratten- bzw. Maus-Gegenstücke. - Es wurde gezeigt, dass Granzyme Entzündungen modulieren, und es wurde festgestellt, dass die Plasmaspiegel von Granzyme B bei atopischer Dermatitis und Psoriasis im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen höher waren. Dies steht im Gegensatz zu den Granzyme-A-Plasmaspiegeln, die unverändert bleiben. Serum von Patienten mit Morbus Crohn weist deutlich höhere Granzyme-B-Spiegel auf als Kontrollen.
Typische Daten
| pg/ml | Außendurchmesser | Durchschnittlich | Korrigiert | |
| 0.00 | 0.0150 | 0.0130 | 0.0140 | |
| 27.43 | 0.0230 | 0.0200 | 0.0215 | 0.0075 |
| 82.30 | 0.0340 | 0.0290 | 0.0315 | 0.0175 |
| 246.91 | 0.0680 | 0.0670 | 0.0675 | 0.0535 |
| 740.74 | 0.1650 | 0.1630 | 0.1640 | 0.1500 |
| 2222.22 | 0.4570 | 0.4220 | 0.4395 | 0.4255 |
| 6666.67 | 1.2100 | 1.1460 | 1.1780 | 1.1640 |
| 20000.00 | 2.7790 | 2.7510 | 2.7650 | 2.7510 |
Präzision
| Intra-Assay-Präzision | Präzision zwischen Assays | |||||
| Probennummer | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Durchschnitt (pg/ml) | 341.6 | 1646.5 | 5204.5 | 367.9 | 1876.2 | 5851.4 |
| Standardabweichung | 22.6 | 94.6 | 295.4 | 8.6 | 63.2 | 192.3 |
| Variationskoeffizient (%) | 6.6 | 5.7 | 5.7 | 2.3 | 3.4 | 3.3 |
Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.
Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.
Spike-Wiederherstellung
Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von Mouse Granzyme B in eine gesunde Mausserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.
Die Wiederherstellung lag zwischen 107 % und 132 %, wobei die durchschnittliche Gesamtwiederherstellung 116 % betrug.
Die Wiederherstellung lag zwischen 107 % und 132 %, wobei die durchschnittliche Gesamtwiederherstellung 116 % betrug.
Beispielwerte
| Beispielmatrix | Probe ausgewertet | Bereich (pg/ml) | Nachweisbar (%) | Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml) |
| Serum | 30 | 10,64-35,31 | 92 | 24.13 |
Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Mäusen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von Granzyme B untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor. n.d. = nicht-nachweisbar. Proben, die unterhalb der Empfindlichkeit liegen, gelten als nicht nachweisbar.
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