Monoklonaler Maus-Antikörper MLH1 (C3426)

Sicherheitsdatenblatt

Hauptmerkmale und Details

Monoklonaler Maus-Antikörper gegen MLH1

Ziel: MLH1
Quelle/Host: Maus
Reaktivität: Mensch, Affe
Klonalität: Monoklonal
Anwendungen: WB, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : AMA03038

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Heterodimerisiert mit PMS2 und bildet MutL alpha, eine Komponente des postreplikativen DNA-Mismatch-Reparatursystems (MMR). Die DNA-Reparatur wird durch die Bindung von MutS alpha (MSH2-MSH6) oder MutS beta (MSH2-MSH3) an eine dsDNA-Fehlpaarung eingeleitet, anschließend wird MutL alpha in den Heteroduplex rekrutiert. Der Zusammenbau des ternären Komplexes MutL-MutS-heteroduplex in Gegenwart von RFC und PCNA reicht aus, um die Endonukleaseaktivität von PMS2 zu aktivieren. Es führt Einzelstrangbrüche in der Nähe der Fehlpaarung ein und generiert so neue Eintrittspunkte für die Exonuklease EXO1, um den Strang mit der Fehlpaarung abzubauen. Eine DNA-Methylierung würde die Spaltung verhindern und somit sicherstellen, dass nur der neu mutierte DNA-Strang korrigiert wird.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IF/ICC	1:50 - 1:100

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Monoklonaler Maus-Antikörper gegen MLH1
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an MLH1-Protein.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	Gereinigtes rekombinantes Fragment von MLH1 (aa381-483), exprimiert in E. Coli.
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 85 kD; Beobachtet: 85 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit in PBS mit 50 % Glycerin, 0,5 % BSA und 0,02 % Natriumazid, pH 7,3.
Alternative Namen	COCA2; DNA-Mismatch-Reparaturprotein Mlh1; MutL-Proteinhomolog 1
Gensymbol	MLH1
Entrez Gene	4292 (Mensch)
SwissProt	P40692 (Mensch)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der MLH1-Expression in Ganzzelllysaten von Hela (A), Jurkat (B), 293T (C) und SW480 (D). (Vorhergesagte Bandengröße: 85 kD; beobachtete Bandengröße: 85 kD)

Immunfluoreszenzanalyse der MLH1-Färbung in HeLa-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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