MKK4 (Phospho-S257) Polyklonaler Kaninchen-Antikörper

Sicherheitsdatenblatt

MKK4 (Phospho-S257) Rabbit Polyclonal Antibody

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen MKK4 (Phospho-S257)

Ziel: MKK4 (Phospho-S257)
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus
Klonalität: Polyklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : APA10926

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Proteinkinase mit doppelter Spezifität, die als wesentlicher Bestandteil des MAP-Kinase-Signaltransduktionswegs fungiert. Wesentlicher Bestandteil des Stress-aktivierten Proteinkinase/c-Jun N-terminalen Kinase (SAP/JNK)-Signalwegs. Mit MAP2K7/MKK7 ist es eine der einzigen bekannten Kinasen, die die stressaktivierte Proteinkinase/c-Jun N-terminale Kinasen MAPK8/JNK1, MAPK9/JNK2 und MAPK10/JNK3 direkt aktiviert. MAP2K4/MKK4 und MAP2K7/MKK7 aktivieren beide die JNKs durch Phosphorylierung, unterscheiden sich jedoch in ihrer Präferenz für die Phosphorylierungsstelle im Thr-Pro-Tyr-Motiv. MAP2K4 bevorzugt die Phosphorylierung des Tyr-Rests und MAP2K7/MKK7 die Phosphorylierung des Thr-Rests.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
IF/ICC	1:50 - 1:200

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen MKK4 (Phospho-S257)
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an MKK4-Protein nur, wenn es an S257 phosphoryliert ist.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	KLH-konjugiertes synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um S257 des menschlichen MKK4-Proteins entspricht. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 44 kD; Beobachtet: 44 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	JNKK1; MEK4; MKK4; PRKMK4; 1 SEK; SERK1; SKK1; Duale Spezifität Mitogen-aktivierte Proteinkinase Kinase 4; MAP-Kinase-Kinase 4; MAPKK 4; JNK-aktivierende Kinase 1; MAPK/ERK-Kinase 4; MEK 4; SAPK/ERK-Kinase 1; 1 SEK; Stress-aktivierte Proteinkinase Kinase 1; SAPK-Kinase 1; SAPKK-1; SAPKK1; c-Jun N-terminale Kinase Kinase 1; JNKK
Gensymbol	MAP2K4
Entrez Gene	6416 (Mensch); 26398(Maus)
SwissProt	P45985 (Mensch); P47809(Maus)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der MKK4 (Phospho-S257)-Expression in K562 (A), Hela (B) und MCF7 (C)-Ganzzelllysaten. (Vorhergesagte Bandengröße: 44 kD; beobachtete Bandengröße: 44 kD)

Immunhistochemische Analyse der MKK4 (Phospho-S257)-Färbung in einem mit Formalin fixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitt des menschlichen Gehirns. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der MKK4 (Phospho-S257)-Färbung in MCF7-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert. Phalloidin - AREX® Fluor 594 wurde zum Färben von Aktinfilamenten (rot) verwendet. Zur Färbung der Zellkerne (blau) wurde DAPI verwendet.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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