Humanes IL-8 ARExSet®-Antikörperpaar für ELISA

Interleukin-8 (IL-8), auch bekannt als IL-8, GCP-1 und NAP-1, ist ein Heparin-bindendes 8-9 kDa-Mitglied der Alpha- oder CXC-Familie der Chemokine. Es gibt mindestens 15 Mitglieder der menschlichen CXC-Familie, die alle eine Struktur aus drei Beta-Faltblättern und einer Alpha-Helix annehmen. Die meisten CXC-Chemokine zeigen ein N-terminales Glu-Leu-Arg (ELR)-Tripeptidmotiv. IL-8 zirkuliert als Monomer, Homodimer und Heterodimer mit CXCL4/PF4. Das Monomer gilt als das bioaktivste, während das Heterodimer die PF4-Aktivität verstärken kann. Die Oligomerisierung von IL-8 wird durch seine Wechselwirkungen mit Matrix- und Zelloberflächen-Glykosaminoglykanen (GAGs) moduliert. Reifes menschliches IL-8 teilt 65-69 % der Aminosäureidentität (aa) mit IL-8 von Hunden, Katzen und Schweinen. Bei Nagetieren gibt es kein Gegenstück zum IL-8-Gen.

Mehrere Isoformen von IL-8 werden sowohl durch alternatives Spleißen als auch durch differenzielle proteolytische Spaltung erzeugt. Beim Menschen erzeugt alternatives Spleißen eine Isoform mit einer elf Aminosäuren-Substitution am C-Terminus. Die proteolytische Verarbeitung führt zur N-terminalen Verkürzung von IL8 und ist wahrscheinlich ein zellspezifisches Ereignis. Beispielsweise erzeugen Fibroblasten und Endothelzellen die 1-77-Form durch Spaltung von IL-8 nach Glu21, während Monozyten und Lymphozyten die 6-77-Form durch Spaltung nach Leu25 erzeugen. Diese verkürzten Formen zeigen im Allgemeinen eine erhöhte Bioaktivität, insbesondere durch den CXCR1-Rezeptor. IL-8 kann auch an Arg27 des Vorläufers einer Citrullinierung unterliegen, einer Modifikation, die seine Halbwertszeit und seine Fähigkeit, Leukozytose zu induzieren, erhöht. Eine Vielzahl von Zellen sezernieren IL-8, darunter Monozyten und Neutrophile, Fibroblasten und Keratinozyten, Mastzellen, viszerale glatte Muskelzellen, dendritische Zellen, große Alveolarzellen vom Typ II und Endothelzellen.

Die Bioaktivität von IL-8 wird durch zwei G-Protein-gekoppelte Rezeptoren vermittelt, die als CXCR1/IL-8 RA und CXCR2/IL-8 RB bezeichnet werden. CXCR1 ist 45-50 kDa groß und wird fast ausschließlich von IL-8 verwendet. CXCR2 ist 35-40 kDa groß und wird von fast allen CXC-Chemokinen verwendet. Sowohl CXCR1 als auch CXCR2 assoziieren konstitutiv zu funktionellen Homodimeren. Sie können auch heterodimerisieren, diese Komplexe dissoziieren jedoch nach der IL-8-Bindung. CXCR2 reagiert auf niedrige Konzentrationen von IL-8 und ist hauptsächlich mit Chemotaxis und MMP-9-Freisetzung verbunden. Im Gegensatz dazu reagiert CXCR1 auf hohe Konzentrationen von IL-8 und ist mit Atemstillstand und Phospholipase D2-Aktivierung verbunden. Somit induziert die CXCR2-Ligation die Leukozytenadhäsion an aktiviertem Gefäßendothel und die Migration zu Entzündungsherden, während die CXCR1-Ligation die antimikrobielle Aktivität von Neutrophilen fördert. IL-8 kann auch einen Komplex mit Serpin A1/alpha-1-Antitrypsin bilden, was die Interaktion von IL-8 mit CXCR1 verhindert.

Zusätzlich zu seinen entzündungsfördernden Wirkungen ist IL-8 an der Angiogenese und der Pathogenese von Arteriosklerose und Krebs beteiligt. Es induziert die VEGF-Expression in Gefäßendothelzellen und fungiert als autokriner Faktor für EC-Wachstum und Angiogenese. Bei atherosklerotischen Läsionen ist es hochreguliert und nach einem Myokardinfarkt im Serum und in der Liquor cerebrospinalis erhöht. Bei Krebs fördert IL-8 den epithelialen/mesenchymalen Übergang sowie die Invasivität und Metastasierung von Tumorzellen.

• Optimierte Capture- und Detection-Antikörperpaarungen mit empfohlenen Konzentrationen sparen lange Entwicklungszeit
• Es werden Entwicklungsprotokolle bereitgestellt, die als Leitfaden für die weitere Assay-Optimierung dienen

• Kostengünstige Alternative zu kompletten Bausätzen

• Antikörper einfangen
• Erkennungsantikörper
• Rekombinanter Standard
• Streptavidin konjugiert an Meerrettich-Peroxidase (Streptavidin-HRP)

1. ARExSet^® Zusatzreagenzien-Kit (5 Platten): enthält 96-Well-Mikrotiterplatten, Plattenversiegelungen, Substratlösung, Stopplösung, Plattenbeschichtungspuffer (PBS), Waschpuffer und Testpuffer.
   
   1. 96-Well-Mikroplatten:AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSEP01. Plattenversiegeler: AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSSF01.
   2. Beschichtungspuffer:137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 8,1 mM Na2HPO4, 1,5 mM KH2PO4, pH 7,2-7,4, 0,2 μm fi
      Gefiltert. AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSCB01.
   3. Blockierungspuffer: AREX Biowissenschaften, Katalog-Nr. DSBB01.
   4. Waschpuffer:0,05 % Tween 20 in PBS, pH 7,2-7,4. AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSWB01.
   5. Testpuffer:0,5 % BSA, 0,05 % Tween20, PBS-Lösung. AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSAB01
      Substratlösung:Tetramethylbenzidin. AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSTS01.
   6. Stopplösung:0,5 mol/ml H2SO4. AREX Biosciences, Katalog-Nr. DSSS01.