Humanes IL-4 ELISA-Kit

Protokollbroschüre

Hauptmerkmale und Details

Spezifikation: 96 Test
Empfindlichkeit: 0,03 pg/ml (50 μl) ；0,28 pg/ml (10 μl)
Standardkurvenbereich: 1,37~1000 pg/ml
Standardkurvensteigung: 7 Punkte/3 Falten
Anzahl der Inkubationen: 2
Probenvolumen: 50 μl/10 μl
Testtyp: Sandwich Elisa
Betriebsdauer: 120min

Marke:

KAT.-NR. : AEH0007

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Größe:

96T

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Produktdetails

Hintergrund

Interleukin-4 (IL-4), auch bekannt als B-Zell-stimulierender Faktor-1, ist ein monomeres, etwa 13 kDa – 18 kDaTh2 großes Zytokin, das bei Immunreaktionen pleiotrope Wirkungen zeigt. Es handelt sich um ein glykosyliertes Polypeptid, das drei Disulfidbrücken innerhalb der Kette enthält und eine gebündelte Vier-Alpha-Helix-Struktur annimmt. Humanes IL-4 wird mit einer 24-aa-Signalsequenz synthetisiert. Durch alternatives Spleißen wird eine Isoform mit einer internen Deletion von 16 Aminosäuren erzeugt. Reifes menschliches IL-4 teilt 55 %, 39 % bzw. 43 % AA-Sequenzidentität mit Rinder-, Maus- bzw. Ratten-IL-4. Menschen-, Maus- und Ratten-IL-4 sind in ihren Aktivitäten artspezifisch. - IL-4 übt seine Wirkung über zwei Rezeptorkomplexe aus. Der Typ-I-Rezeptor, der auf hämatopoetischen Zellen exprimiert wird, ist ein Heterodimer des Liganden, der IL-4 R alpha und die gemeinsame Gammakette bindet (eine gemeinsame Untereinheit der Rezeptoren für IL-2, -7, -9, -15 und -21). Der Typ-II-Rezeptor auf nichthämatopoetischen Zellen besteht aus IL-4 R alpha und IL-13 R alpha 1. Der Typ-II-Rezeptor überträgt auch IL-13-vermittelte Signale. IL-4 wird hauptsächlich von Th2-voreingenommenen CD4+ T-Zellen, Mastzellen, Basophilen und Eosinophilen exprimiert. Es fördert die Zellproliferation, das Überleben und den Wechsel der Immunglobulinklasse zu IgG4 und IgE in menschlichen B-Zellen, den Erwerb des Th2-Phänotyps durch naive CD4+ T-Zellen, das Priming und die Chemotaxis von Mastzellen, Eosinophilen und Basophilen sowie die Proliferation und Aktivierung von Epithelzellen. IL-4 spielt eine entscheidende Rolle bei der Entstehung allergischer Entzündungen und Asthma.

Typische Daten

pg/ml	Außendurchmesser		Durchschnittlich	Korrigiert
0	0.0089	0.0085	0.0087
1.37	0.0163	0.0168	0.0166	0.0079
4.12	0.031	0.0371	0.0341	0.0254
12.35	0.0855	0.0907	0.0881	0.0794
37.04	0.2498	0.2553	0.2526	0.2439
111.11	0.7143	0.7335	0.7239	0.7152
333.33	1.9249	1.9264	1.9257	1.917
1000	3.8591	3.7755	3.8173	3.8086

Präzision

	Intra-Assay-Präzision			Präzision zwischen Assays
Probennummer	S1	S2	S3	S1	S2	S3
Probennummer	22	22	22	6	6	6
Durchschnitt (pg/ml)	24.9	124.6	243.4	28.5	126.1	219.8
Standardabweichung	1.3	5.5	8.2	1.9	6	6.4
Variationskoeffizient (%)	3.4	4.5	5.1	6.5	4.7	2.9

Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden zwanzigmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.

Spike-Wiederherstellung

Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von menschlichem IL-4 zu einer gesunden menschlichen Serumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.

Die Wiederherstellung lag zwischen 88 % und 105 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 98 %.

Beispielwerte

Beispielmatrix	Probe ausgewertet	Bereich (pg/ml)	Nachweisbar (%)	Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml)
Serum	30	n.d.-0,49	80	0.13

Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Freiwilligen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von IL-10 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.

n.d. = nicht-nachweisbar. Proben, die unterhalb der Empfindlichkeit liegen, gelten als nicht nachweisbar.

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