Humanes IL-1RA/IL-1F3 ELISA-Kit

Der Interleukin-1-Rezeptorantagonist (IL-1ra; auch bekannt als IL-1F3) ist ein 22-25 kDa großes Mitglied der IL-1-Zytokinfamilie. Derzeit gibt es 11 Familienmitglieder (IL-1F1-F11), von denen neun einen IL-1-Gencluster auf menschlichem Ch2 bilden. Jedes IL-1-Familienmitglied enthält eine IL-1-Falte. Diese Falte wird durch 12 gepackte Beta-Blätter erzeugt, die zusammenwirken, um eine Beta-Kleeblatt-Struktur zu bilden. Um diese Struktur zu erreichen, ist eine geringe Aminosäurehomologie (aa) erforderlich, was die geringe aa-Identität zwischen Mitgliedern der IL-1-Familie erklärt. IL-1ra ist ein reiner Zytokinrezeptor-Antagonist, der keine signaltransduktionsinitiierende Aktivität aufweist. Es handelt sich um ein Akute-Phase-Protein, das Entzündungen dämpfen soll. IL-1(beta) wird zunächst von Monozyten als Reaktion auf eine Vielzahl von Reizen produziert. Zirkulierendes IL-1 bindet dann an weit verbreitete IL-1-Typ-I-Rezeptoren (IL-1 RI) und löst eine Reihe entzündungsfördernder Ereignisse aus. Auf Endothelzellen (EC) induziert IL-1 die Freisetzung von PGE2 und IL-6, was zu Fieber, Thrombozytose und hepatischer Akute-Phase-Proteinproduktion führt. In Synovialgelenken induziert IL-1 die NO-Produktion der Chondrozyten, was zu einer verminderten Kollagensynthese und Apoptose der Chondrozyten führt. Schließlich erhöht IL-1 die Neutrophilenzahl sowohl im Blut als auch im Gewebe und ist somit in der Lage, an mehreren Stellen ein entzündungsförderndes Milieu zu fördern. IL-1ra blockiert die Wirkung von IL-1 durch Konkurrenzhemmung. Genauer gesagt: Obwohl IL-1ra die IL-1-Bindungsstelle in IL-1 RI füllt, ist es auch nicht in der Lage, die Bildung eines signalübertragenden IL-1 RI:IL-1 R-Akzessorprotein-Heterodimerkomplexes (IL-1 R AcP) zu orchestrieren. Effektive IL-1ra-Konzentrationen sind im Allgemeinen 100-fach höher als lokale IL-1-Konzentrationen. Dies liegt daran, dass die IL-1ra-Halbwertszeit nur 6 Minuten beträgt und nur sehr wenige IL-1-Typ-I-Rezeptoren von IL-1 aktiviert werden müssen, um eine zelluläre Reaktion auszulösen.

Humanes IL-1ra wird als 177-aa-Vorläufer synthetisiert, der eine 25-aa-Signalsequenz und eine 152-aa-reife Region enthält. Obwohl es eine IL-1-Zytokinfalte enthält, fehlen ihm offenbar zwei Strukturmotive, die eine Aktivierung des IL-1-Rezeptor-Heterodimers ermöglichen. Erstens und nach der Bindung an IL-1 RI schließt das Vorhandensein von Ile 51-His 54 und Lys 145 des reifen Moleküls die Rekrutierung von IL-1 R AcP aus. Zweitens gibt es kein identifizierbares C-terminales Lektinsegment, von dem angenommen wird, dass es bei der Rekrutierung einer akzessorischen Signalkomponente hilft. Reifes menschliches IL-1ra ist zu 77 % bzw. 82 % mit IL-1ra von Maus und Hund identisch, und menschliches IL-1ra hemmt die IL-1-Aktivität auf Mauszellen. Eine Reihe von Zelltypen exprimieren IL-1ra, darunter Monozyten, Sertoli-Zellen, Hepatozyten, Adipozyten, Synovialfibroblasten, Mastzellen, Pankreas-Betazellen und Darmepithelzellen. Es gibt mindestens drei intrazelluläre IL-1ra-Isoformen (icIL-1ra1, 2 und 3). Alle weisen eine N-terminale Variation auf und alle enthalten die Aminosäuren 35-177 des sekretierten Vorläufers. Intrazelluläres IL-1ra1 ist von besonderem Interesse, da es Berichten zufolge von Endothelzellen „sekretiert“ wird und antagonistisch an den IL-1-RI bindet. Intrazelluläres IL-1ra1 hat eine Länge von 159 Aminosäuren und zeigt eine 3-AA-Substitution für die ersten 21 Aminosäuren der Signalsequenz von IL-1ra.

Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Freiwilligen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von IL-1RA untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.