Humanes CTLA-4 ELISA-Kit
KAT.-NR. : AEH0179
US$ Bitte wählen
US$ Bitte wählen
Größe:
Trail-, Großformat- oder Sonderwünsche Bitte kontaktieren Sie uns
Hintergrund
CTLA-4 (zytotoxischer T-Lymphozyten-4, bezeichnet als CD152) ist ein Typ-I-Transmembran-T-Zell-inhibitorisches Molekül, das zur Ig-Superfamilie gehört. Die CTLA-4-cDNA von Mensch oder Maus kodiert für 223 Aminosäuren (aa), einschließlich einer Signalsequenz von 35 aa, einer extrazellulären Domäne (ECD) von 126 aa mit einer Ig-like V--Typ-Domäne, einer Transmembransequenz (TM) von 21 aa und einer zytoplasmatischen Sequenz von 41 aa. Es liegt als kovalentes Homodimer mit 41–43 kDa vor. Innerhalb der ECD teilt menschliches CTLA-4 68 %, 71 % bzw. 83–86 % AA-Sequenzidentität mit CTLA-4 von Maus, Ratte und Schwein/Rind/Kaninchen/Katze/Hund. Möglicherweise wird eine 174-aa-Form sezerniert, der TM und zytoplasmatische Sequenzen fehlen (sCTLA-4). Es werden Isoformen mit 56–79 Aminosäuren beschrieben, die hauptsächlich Teile der zytoplasmatischen Domäne enthalten. Bei Mäusen weist eine Isoform, der die Ig-like-Domäne fehlt, eine ligandenunabhängige Hemmwirkung auf und wird als liCTLA-4 bezeichnet. CD28, das strukturell mit CTLA-4 verwandt ist, wird konstitutiv auf naiven T-Zellen exprimiert und fördert die T-Zell-Aktivierung, wenn es von B7-2 auf antigenpräsentierenden Zellen (APC) innerhalb der immunologischen Synapse (IS) aktiviert wird. Im Gegensatz dazu wird CTLA-4 ab 1, 2 Tagen nach der T-Zell-Aktivierung aus intrazellulären Vesikeln zum IS rekrutiert. Es bildet mit B7-1 auf APC ein lineares Gitter, das negative regulatorische Signale induziert und die T-Zell-Aktivierung beendet. Abatacept, ein therapeutisches menschliches CTLA-4-Ig-Fusionsprotein (Handelsname Orencia), konkurriert mit CD28 um die Bindung von B7-1 und B7-2 und wurde verwendet, um die T-Zell-Aktivierung bei Autoimmunerkrankungen zu antagonisieren und das Transplantatüberleben zu verbessern. Mäuse, denen CTLA-4 fehlt, zeigen bis nach der Geburt keine Anomalien, entwickeln dann aber tödliche Autoimmunreaktionen aufgrund der fortgesetzten T-Zell-Aktivierung und der schlechten Kontrolle durch regulatorische T-Zellen, die CTLA-4 bei Wildtyp-Mäusen und Menschen konstitutiv exprimieren.
Typische Daten
|
pg/ml |
Außendurchmesser |
Durchschnittlich |
Korrigiert |
|
|
0.00 |
0.0105 |
0.0103 |
0.0104 |
|
|
2.74 |
0.0171 |
0.0159 |
0.0165 |
0.0061 |
|
8.23 |
0.0282 |
0.0271 |
0.0277 |
0.0173 |
|
24.69 |
0.0616 |
0.0611 |
0.0614 |
0.0510 |
|
74.07 |
0.1683 |
0.1480 |
0.1582 |
0.1478 |
|
222.22 |
0.5143 |
0.4790 |
0.4967 |
0.4863 |
|
666.67 |
1.5540 |
1.5790 |
1.5665 |
1.5561 |
|
2000.00 |
3.9590 |
3.9100 |
3.9345 |
3.9241 |
Präzision
|
Intra-Assay-Präzision |
Präzision zwischen Assays |
|||||
|
Probennummer |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Durchschnitt (pg/ml) |
53.1 |
266.2 |
814.9 |
17.2 |
77.5 |
231.4 |
|
Standardabweichung |
2.9 |
9.1 |
34.8 |
1.3 |
5.1 |
12.0 |
|
Variationskoeffizient (%) |
5.5 |
3.4 |
4.3 |
7.8 |
6.6 |
5.2 |
Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays) Drei Proben bekannter Konzentration wurden sechsmal auf einer Platte getestet, um die Intra-Assay-Präzision zu beurteilen.
Spike-Wiederherstellung
Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von humanem CTLA-4 in eine gesunde Humanserumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.
Die Wiederherstellung lag zwischen 91 % und 97 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 94 %.
Die Wiederherstellung lag zwischen 91 % und 97 %, mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 94 %.
Beispielwerte
| Beispielmatrix | Probe ausgewertet | Bereich (pg/ml) | Nachweisbar (%) | Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Serum | 30 | 0,31-3,78 | 100 | 1.11 |
Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Freiwilligen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von CTLA-4 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.
Neue Produkte
