Polyklonaler Kaninchen-Antikörper EGLN1

Sicherheitsdatenblatt

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen EGLN1

Ziel: EGLN1
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte
Klonalität: Polyklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : APA12580

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Zellulärer Sauerstoffsensor, der unter normoxischen Bedingungen die posttranslationale Bildung von 4-Hydroxyprolin in Alpha-Proteinen des Hypoxie-induzierbaren Faktors (HIF) katalysiert. Hydroxyliert ein spezifisches Prolin, das in jeder der sauerstoffabhängigen Abbaudomänen (ODD) (N-terminal, NODD und C-terminal, CODD) von HIF1A vorkommt. Hydroxyliert auch HIF2A. Bevorzugt die CODD-Stelle sowohl für HIF1A als auch für HIF1B. Hydroxylierte HIFs werden dann über den Ubiquitinierungskomplex von Hippel-Lindau für den proteasomalen Abbau gezielt eingesetzt. Unter hypoxischen Bedingungen wird die Hydroxylierungsreaktion abgeschwächt, sodass HIFs dem Abbau entgehen können, was zu ihrer Translokation in den Zellkern, einer Heterodimerisierung mit HIF1B und einer erhöhten Expression von Hypoxie-induzierbaren Genen führt.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:2000
IHC	1:50 - 1:200
IF/ICC	1:50 - 1:200

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen EGLN1
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an EGLN1-Protein.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	Rekombinantes Fusionsprotein von menschlichem EGLN1
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 36; Beobachtet: 46 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	C1orf12; Egl neun Homolog 1; Hypoxie - induzierbarer Faktor Prolylhydroxylase 2; HIF-PH2; HIF-Prolylhydroxylase 2; HPH-2; Prolylhydroxylase-Domäne-enthaltend Protein 2; PHD2; SM-20
Gensymbol	EGLN1
Entrez Gene	54583 (Mensch); 112405(Maus)
SwissProt	Q9GZT9 (Mensch); Q91YE3(Maus); P59722(Ratte)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der EGLN1-Expression in Ganzzelllysaten von SHSY5Y (A), Hela (B) und COS7 (C). (Vorhergesagte Bandengröße: 36; 43; 46 kD; beobachtete Bandengröße: 46 kD)

Immunhistochemische Analyse der EGLN1-Färbung in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten menschlichen Nierengewebeabschnitten. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der EGLN1-Färbung in MCF7-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem DyLight 594-konjugierten Sekundärantikörper (rot) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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