c-Jun Polyklonaler Kaninchen-Antikörper

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen c-Jun
  • Ziel: c-Jun
  • Quelle/Host: Kaninchen
  • Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte, Rind, Huhn, Schwein
  • Klonalität: Polyklonal
  • Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC, IP, FC, ChIP
  • Konjugation: Unkonjugiert
  • Lagerung: bei -20°C
  • Marke:
KAT.-NR. : APA07167
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Größe:
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Produktdetails
Hintergrund
Transkriptionsfaktor, der das AP-1-Konsensusmotiv 5'-TGA[GC]TCA-3' erkennt und daran bindet. Heterodimerisiert mit Proteinen der FOS-Familie, um einen AP-1-Transkriptionskomplex zu bilden, wodurch seine DNA-Bindungsaktivität an die AP-1-Konsensussequenz 5'-TGA[GC]TCA-3' und seine Transkriptionsaktivität erhöht werden. Spielt zusammen mit FOSB eine Rolle beim aktivierungsinduzierten Zelltod von T-Zellen, indem es an die AP-1-Promotorstelle von FASLG/CD95L bindet und dessen Transkription als Reaktion auf die Aktivierung des TCR/CD3-Signalwegs induziert. Fördert die Aktivität von NR5A1, wenn es durch HIPK3 phosphoryliert wird, was zu einer erhöhten steroidogenen Genexpression bei Stimulation des cAMP-Signalwegs führt. Beteiligt an der aktivierten KRAS-vermittelten Transkriptionsaktivierung von USP28 in Darmkrebszellen (CRC).
Bewerbung
Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB

1:500 - 1:1000

IHC

1:100 - 1:200

IF/ICC

1:50 - 1:200

IP

1:10 - 1:100

FC

1:100 - 1:300

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.
Übersicht

Beschreibung

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen c-Jun

Spezifität

Erkennt endogene Mengen an c-Jun-Protein.

Antikörpertyp

Primärer Antikörper

Immunogen

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das eine Sequenz innerhalb der zentralen Region von menschlichem c-Jun umfasst. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.

Reinigung

Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.

Molekulargewicht

Voraussichtlich: 35 kD; Beobachtet: 43 kD

Form/Puffer

Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.

Alternative Namen

Transkriptionsfaktor AP-1; Aktivatorprotein 1; AP1; Protoonkogen c-Jun; V-jun Aviäres Sarkomvirus 17-Onkogen-Homolog; S. 39

Gensymbol

JUNI

Entrez Gene

3725 (Mensch); 16476(Maus); 24516(Ratte)

SwissProt

P05412 (Mensch); P05627(Maus); P17325(Ratte)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.
Daten

Western-Blot-Analyse der c-Jun-Expression in Ganzzelllysaten von PC3 (A) und H1688 (B). (Vorhergesagte Bandengröße: 35 kD; beobachtete Bandengröße: 43 kD)

Immunhistochemische Analyse der c-Jun-Färbung in einem formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitt bei menschlichem Brustkrebs. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der c-Jun-Färbung in RAW264.7-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert. Phalloidin - AREX® Fluor 594 wurde zum Färben von Aktinfilamenten (rot) verwendet. Zur Färbung der Zellkerne (blau) wurde DAPI verwendet.

Immunpräzipitation von c-Jun aus 0,5 mg HEK293T-Ganzzellextraktlysat unter Verwendung von 5 µg Anti-c-Jun-Antikörper und 50 µl magnetischen Protein-G-Beads (+). Der Kontrolle (-) wurde kein Antikörper zugesetzt. Der Antikörper wurde unter Rühren mit Protein-G-Kügelchen 10 Minuten lang inkubiert, in RIPA-Puffer verdünntes HEK293T-Ganzzellextrakt-Lysat wurde zu jeder Probe gegeben und weitere 10 Minuten unter Rühren inkubiert. Die Proteine ​​wurden durch Zugabe von 40 μl SDS-Ladepuffer eluiert und 10 Minuten lang bei 70 °C inkubiert; 10 µl jeder Probe wurden auf einem SDS-PAGE-Gel aufgetrennt, auf eine Nitrozellulosemembran übertragen, mit 5 % BSA blockiert und mit Anti-c-Jun Antibody sondiert.

ChIP-Analyse menschlicher Endothelzellen (EA.hy926), 10 Stunden lang bei 4 °C inkubiert. Vernetzung (X-ChIP) mit Formaldehyd für 10 Minuten. Positivkontrolle: Position 89340150-89340297 in Chromosom 11 (hat eine validierte c-Jun-Stelle). Negative Kontrolle: Igr5-Intron 3 (enthält keine c-Jun-Bindungsstelle). Nachweisschritt: Real-time PCR.

Lagerung
Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.
Hinweis
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.
FAQs
Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?
Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.
Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?
Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.
Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?
Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.
Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?
Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.
Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?
Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.
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