ATG4A monoklonaler Kaninchen-Antikörper (C1322)

Sicherheitsdatenblatt

Hauptmerkmale und Details

Rekombinanter monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen ATG4A

Ziel: ATG4A
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte
Klonalität: Monoklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : AMA00934

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Cysteinprotease, die eine Schlüsselrolle bei der Autophagie spielt, indem sie sowohl die proteolytische Aktivierung als auch die Delipidierung von Proteinen der ATG8-Familie vermittelt. Die Proteaseaktivität ist für die proteolytische Aktivierung von Proteinen der ATG8-Familie erforderlich: spaltet die C-terminale Aminosäure von ATG8-Proteinen, um ein C-terminales Glycin freizulegen. Die Exposition des Glycins am C-Terminus ist für die Konjugation von ATG8-Proteinen an Phosphatidylethanolamin (PE) und die Insertion in Membranen wichtig, was für die Autophagie notwendig ist. Bevorzugtes Substrat ist GABARAPL2, gefolgt von MAP1LC3A und GABARAP. Proteaseaktivität ist auch erforderlich, um der Bildung hochmolekularer Konjugate von ATG8-Proteinen entgegenzuwirken (ATG8ylierung): Wirkt als deubiquitinierendes Enzym, das an andere Proteine wie ATG3 konjugiertes ATG8 entfernt.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
IF/ICC	1:50 - 1:200

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Rekombinanter monoklonaler Kaninchen-Antikörper gegen ATG4A
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an ATG4A-Protein
Antikörpertyp	Primärer Antikörper, rekombinant
Immunogen	KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das eine Sequenz innerhalb des menschlichen ATG4A-Proteins umfasst. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 45 kD; Beobachtet: 45 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit in PBS, pH 7,4, enthält 50 % Glycerin, 0,2 % BSA und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	APG4A; AUTL2; Cysteinprotease ATG4A; AUT-like 2 Cystein-Endopeptidase; Autophagin-2; Autophagie-verwandte Cystein-Endopeptidase 2; Autophagie-verwandtes Protein 4 Homolog A; hAPG4A
Gensymbol	ATG4A
Entrez Gene	115201 (Mensch); 666468(Maus)
SwissProt	Q8WYN0(Mensch); Q8C9S8(Maus)

*AREX optimiert seine Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler. Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der ATG4A-Expression in Ganzzelllysaten von K562 (A), Hela (B), PC3 (C), Mausniere (D), Mausmuskel (E), Rattenniere (F), Rattenmuskel (G). (Vorhergesagte Bandengröße: 45 kD; beobachtete Bandengröße: 45 kD)

Immunhistochemische Analyse der ATG4A-Färbung in menschlichen Tonsillen-Formalin-fixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der ATG4A-Färbung in A375-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert. Phalloidin - AREX® Fluor 594 wurde zum Färben von Aktinfilamenten (rot) verwendet. Zur Färbung der Zellkerne (blau) wurde DAPI verwendet.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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