AKT (Phospho-S473) Polyklonaler Kaninchen-Antikörper

Sicherheitsdatenblatt

AKT (Phospho-S473) Rabbit Polyclonal Antibody

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen AKT (Phospho-S473)

Ziel: AKT (Phospho-S473)
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte, Rind, Huhn, Schwein, Zebrafisch
Klonalität: Polyklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : APA09608

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

AKT1 ist eine von drei eng verwandten Serin/Threonin-Proteinkinasen (AKT1, AKT2 und AKT3), die als AKT-Kinase bezeichnet werden und viele Prozesse regulieren, darunter Stoffwechsel, Proliferation, Zellüberleben, Wachstum und Angiogenese, sogenannte AKT-Kinase, und die viele Prozesse regulieren, darunter Stoffwechsel, Proliferation, Zellüberleben, Wachstum und Angiogenese. Dies wird durch Serin- und/oder Threonin-Phosphorylierung einer Reihe nachgeschalteter Substrate vermittelt. Bisher wurden über 100 Substratkandidaten gemeldet, für die meisten von ihnen wurde jedoch keine Isoformspezifität berichtet. AKT ist für die Regulierung der Glukoseaufnahme verantwortlich, indem es die durch Insulin induzierte Translokation des SLC2A4/GLUT4-Glukosetransporters zur Zelloberfläche vermittelt.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
IF/ICC	1:100 - 1:500

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen AKT (Phospho-S473)
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an AKT-Protein nur, wenn es an S473 phosphoryliert ist.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	KLH-konjugiertes synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um S473 des menschlichen AKT-Proteins entspricht. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 55 kD; Beobachtet: 60 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	PKB; RAC; RAC-Alpha-Serin/Threonin-Proteinkinase; Proteinkinase B; PKB; Proteinkinase B alpha; PKB-alpha; Proto-onkogen c-Akt; RAC-PK-alpha
Gensymbol	AKT1; AKT2; AKT3
Entrez Gene	207 (Mensch); 11651(Maus); 24185(Ratte)
SwissProt	P31749 (Mensch); P31750(Maus); P47196(Ratte)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der AKT (Phospho-S473)-Expression in Ganzzelllysaten von U87MG (A), HEK293T (B) und A549 (C). (Vorhergesagte Bandengröße: 55 kD; beobachtete Bandengröße: 60 kD)

Immunhistochemische Analyse der AKT (Phospho-S473)-Färbung in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten von menschlichem Brustkrebs. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der AKT (Phospho-S473)-Färbung in MCF7-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem DyLight 594-konjugierten Sekundärantikörper (rot) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren geeignet.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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